睡眠剝奪對大鼠學習記憶影響的機制及防護措施研究.pdf

1、研究背景 睡眠和覺醒周期是人類和大多數(shù)哺乳動物生存的必要條件。由于現(xiàn)階段生活節(jié)奏的加快、工作壓力的增大，睡眠剝奪的問題越來越受到人們的重視。睡眠剝奪可引起機體免疫力降低，警覺性和判斷力、學習記憶能力下降，但其作用機制尚不明確。 實驗目的 通過建立大鼠異相睡眠剝奪的動物模型，觀察睡眠剝奪對學習記憶能力的影響，探討其作用機制，并進一步觀察刺五加對睡眠剝奪損傷的防護作用。 實驗方法 采用改良多平臺法制備

2、異相睡眠剝奪模型。運用Morris水迷宮的定位航行及空間搜索實驗來觀察睡眠剝奪對大鼠空間學習記憶的影響；Nissl染色、免疫組織化學法、透射電鏡及Western-Blot技術等手段觀察睡眠剝奪后不同時間點大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元形態(tài)、超微結構的改變、神經(jīng)元凋亡及其相關蛋白的表達。 實驗結果 1．Morris水迷宮的實驗結果顯示，對照組和睡眠剝奪組大鼠在實驗中所用時間、游泳路程變化的總趨勢相同，越來越趨向于在平臺的位置搜索，

3、但睡眠剝奪組較對照組潛伏期1所用時間增長，有顯著性差異，潛伏期2之間比較沒有顯著性差異。 2．Nissl染色結果顯示，與對照組相比睡眠剝奪組海馬CA1區(qū)細胞數(shù)量減少，細胞排列松散，出現(xiàn)大量空泡；透射電鏡檢測顯示睡眠剝奪組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元軸突水腫明顯，內(nèi)質網(wǎng)擴張，線粒體腫脹，嵴結構模糊、紊亂，線粒體數(shù)量減少，有的呈空泡樣變。 3．免疫組織化學與Western-Blot結果均顯示，與對照組相比睡眠剝奪組海馬CA1區(qū)Bax易

4、位到線粒體，細胞漿內(nèi)的Bax表達明顯減少；線粒體內(nèi)Cyt-c釋放到胞漿，胞漿內(nèi)的Cyt-c表達明顯增高。 4．給予刺五加灌胃處理后，大鼠Morris水迷宮訓練潛伏期1較未加藥組明顯縮短，海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元形態(tài)損傷亦有所減輕。 主要結論 1．睡眠剝奪降低大鼠空間學習記憶能力，但不影響其工作記憶的形成和維持； 2．在睡眠剝奪后海馬神經(jīng)元有明顯損傷，神經(jīng)元形態(tài)的改變直接影響其正常生理功能的發(fā)揮，這可能是睡眠