反義鯊烯合酶基因表達對青蒿素生物合成的影響.pdf

1、青蒿素是從中藥青蒿中提取的新型抗瘧藥物，然而，青蒿素在青蒿中的含量非常低。近年來，隨著青蒿素生物合成途徑相關酶基因的克隆，基因工程成為提高青蒿素含量的有效途徑之一。在對青蒿進行遺傳轉化過程中，高效穩(wěn)定的叢生芽誘導體系是青蒿轉化成功的關鍵。然而，隨著繼代次數(shù)的增多，青蒿叢生芽誘導能力存在退化現(xiàn)象。本文首先研究了濾紙對青蒿叢生芽誘導的影響和在遺傳轉化中的應用，進而研究了反義鯊烯合酶基因表達對青蒿素生物合成的影響。主要結果如下：
　　

2、 研究了在叢生芽誘導培養(yǎng)基上加鋪濾紙對青蒿叢生芽誘導的影響，結果發(fā)現(xiàn)，加鋪濾紙后青蒿叢生芽誘導率顯著提高，叢生芽誘導率能夠達到97％左右。在此高效叢生芽誘導體系的基礎上，我們進一步探討了濾紙在青蒿遺傳轉化中的應用。結果表明，在篩選培養(yǎng)基上加鋪一層濾紙，青蒿的抗性叢生芽誘導率能夠達到59.7％，其中在12.5％的抗性叢生芽中能夠得到抗性生根植株，生根植株PCR檢測均為陽性，在部分PCR檢測陽性的植株中檢測到了GUS的穩(wěn)定表達。