越橘種質(zhì)資源的CDDP遺傳多樣性及聚類(lèi)分析.pdf

1、越橘（Vaccinium spp.）果實(shí)具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健功效。我國(guó)越橘屬野生資源豐富，引進(jìn)栽培品種眾多。但長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)越橘引進(jìn)品種的真實(shí)遺傳背景不甚明確，野生資源與引進(jìn)栽培品種間的遺傳多樣性及親緣關(guān)系尚不清楚，給越橘種質(zhì)資源的收集、保護(hù)、利用及新品種的培育帶來(lái)了諸多不利。利用分子標(biāo)記方法對(duì)越橘種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性及親緣關(guān)系分析，對(duì)資源的保護(hù)、利用及種質(zhì)創(chuàng)新具有重要的意義。本研究采用新型目的基因分子標(biāo)記CDDP（conserved

2、 DNA-derived polymorphism）技術(shù)研究了我國(guó)野生篤斯越橘與31個(gè)引進(jìn)栽培品種間的遺傳多樣性及親緣關(guān)系，篩選并新開(kāi)發(fā)了可用于越橘品種鑒別的CDDP引物。主要研究結(jié)果如下:
　　1.采用單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了CDDP-PCR反應(yīng)體系:20μL體系中，模板濃度1.5 ng/μL，引物濃度0.4 pmol/μL，鎂離子濃度1.5 nmol/μL，脫氧核苷酸濃度0.375 nmol/μL，Taq酶用量1.5 U。
　　

3、2.從已發(fā)表引物中篩選出在越橘中多態(tài)性高、擴(kuò)增條帶清晰易辨的17條引物。32份樣品共檢測(cè)到207條帶，其中多態(tài)性條帶188條，比例為90.82％，特異性條帶17條，比例為8.21％。在種群水平上，平均有效等位基因數(shù)、Nei's遺傳多樣性指數(shù)和Shannon信息指數(shù)分別為1.59、0.37、0.56。樣本間的遺傳相似性系數(shù)范圍在0.44～1.00之間，平均值為0.73。
　　3.在相似系數(shù)為0.69時(shí)，32個(gè)越橘種質(zhì)分成3類(lèi)，野生品

4、種篤斯越橘單獨(dú)聚為一類(lèi)，矮叢品種‘Blomidon’和半高叢品種‘Northblue’聚為一類(lèi)，其余品種聚為一大類(lèi)。CDDP標(biāo)記在越橘中具有較高的多態(tài)性及特異性，與種質(zhì)的需冷量、抗寒性及果實(shí)顏色具有一定的相關(guān)性。
　　4.根據(jù)抗寒基因CBF及花青素合成相關(guān)基因保守序列開(kāi)發(fā)出新CDDP引物。CBF基因的14條引物共擴(kuò)增出165條帶，其中多態(tài)性條帶163條，比例為98.79％，特異性條帶25條，比例為15.15％?；ㄇ嗨睾铣苫虻?2