辣椒花藥培養(yǎng)胚狀體誘導(dǎo)影響因子探究.pdf_第1頁(yè)
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1、辣椒(Capsicum annuum L.)因其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高,且烹飪方式多種多樣,因此,在我國(guó)廣泛種植,是一種重要的蔬菜作物。辣椒屬于常異花授粉作物,天然雜交率較高,所以利用傳統(tǒng)常規(guī)的育種方法培育辣椒新品種,不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力,而且選育的效率較低。而利用花藥培養(yǎng)可以在短時(shí)間內(nèi)獲得純系,進(jìn)而縮短育種周期、提高育種效率,節(jié)省大量人力物力。而目前,辣椒花藥培養(yǎng)還沒(méi)有一種有效的通用的可以直接獲得胚狀體的技術(shù)體系。本實(shí)驗(yàn)是在前人研究的基礎(chǔ)上,通過(guò)一系列

2、對(duì)辣椒花藥培養(yǎng)胚狀體誘導(dǎo)的因素以及胚狀體誘導(dǎo)成苗技術(shù)進(jìn)行摸索和探討研究,使辣椒花藥培養(yǎng)體系進(jìn)一步優(yōu)化,旨在建立簡(jiǎn)單、高效的辣椒花藥培養(yǎng)體系。研究結(jié)果如下:
  1.小孢子發(fā)育時(shí)期與辣椒花蕾外部形態(tài)特征之間的關(guān)系
  以6個(gè)不同基因型辣椒為試材,研究辣椒小孢子發(fā)育時(shí)期與其花蕾外部形態(tài)特征之間的關(guān)系。結(jié)果表明:辣椒小孢子發(fā)育時(shí)期與其花蕾的外部形態(tài)特征以及花藥的顏色之間有一定的對(duì)應(yīng)關(guān)系。供試?yán)苯凡牧系男℃咦犹幱趩魏丝窟吰跁r(shí),花瓣微

3、露,花萼與花瓣等長(zhǎng)或者花瓣稍微長(zhǎng)于花萼,花藥表現(xiàn)為頂端淺紫色,且紫色部分占整個(gè)花藥的1/4~1/3。
  2.辣椒花藥培養(yǎng)影響因子研究
  以13個(gè)不同基因型辣椒材料為試材,對(duì)影響花藥培養(yǎng)的因子外源激素、碳源(蔗糖、麥芽糖、葡萄糖)、低溫預(yù)處理、外源有機(jī)添加物、活性炭及植株開(kāi)花時(shí)期進(jìn)行研究。研究表明:1)所有供試材料均可誘導(dǎo)出胚狀體,其中有8個(gè)基因型可獲得健壯的再生植株,基因型是限制辣椒花藥培養(yǎng)誘導(dǎo)胚狀體的關(guān)鍵因素,不同基因

4、型間出胚率不同,其中‘G201,出胚率最高,達(dá)到31.76%。2)不同外源激素處理:NAA比IAA更適合辣椒的花藥培養(yǎng),且NAA與KT濃度配比以0.5∶1.0效果最佳。3)不同碳源處理:30g/L的蔗糖比30g/L的麥芽糖更適合辣椒花藥培養(yǎng)。4)不同預(yù)處理:4℃低溫預(yù)處理1-3d有利于胚狀體的誘導(dǎo),其中以處理2d時(shí)的出胚率最高。5)不同外源添加物處理:有利于胚狀體發(fā)生的為50μmol/L的AgNO3和活性炭為4g/L。6)處于初花期和盛

5、花期的花蕾均可誘導(dǎo)成胚狀體,其中初花期花蕾更適合辣椒花藥培養(yǎng)。
  3.辣椒再生植株的誘導(dǎo)生根和移栽
  以試驗(yàn)所獲得的8種基因型的再生植株為試材,對(duì)辣椒再生植株生根及馴化移栽技術(shù)進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明:同一品種辣椒在不同激素濃度處理中的生根誘導(dǎo)率有所不同,不同基因型在相同激素濃度中生根率也有差異,且最適合辣椒生根的培養(yǎng)基為:1/2MS+0.15mg/LIBA+30g/L蔗糖+8g/l瓊脂,生根率最高可達(dá)100%。生根后的再

6、生植株移栽成活與否是辣椒應(yīng)用于生產(chǎn)的最后一個(gè)關(guān)鍵技術(shù),本文介紹了辣椒再生植株移栽時(shí)的馴化、基質(zhì)配制、取苗、消毒以及移栽等技術(shù)。
  4.再生植株的倍性鑒定
  以試驗(yàn)所得到的再生植株為材料,利用根尖染色體鑒定法鑒定其倍性。研究結(jié)果表明:供試材料‘G201’的5株再生植株為單倍體,3株為二倍體;‘G203’的3株再生植株中有2株是單倍體和1株為二倍體;‘G205’、‘G208’和‘G213’的各一株再生植株均單倍體;而‘G21

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