缺氧缺血性腦損傷新生大鼠HIF-1α的表達和參麥的保護作用及其機制的研究.pdf

1、目的：本試驗以HIBD新生大鼠模型為研究對象，通過測定HIBD后14d各組新生大鼠體重增長率的變化，不同時間點神經細胞凋亡率、Bcl-2、Bax、HIF-1αmRNA表達的變化，探討參麥注射液(SMI)對HIBD新生大鼠的保護作用及其可能機制。 方法：將新生7日齡 Sprague-Dawllcy(Sp)大鼠，隨機分為假手術組(S)、SMI 預處理組(P)、SMI治療組(SM)、生理鹽水對照組(C)。每組按術后觀察時聞點不同進一步

2、分為HI后2h、12h、24h、3d、7d、14d、28d 7個亞組。把實驗分成四部分：1．HI對新生大鼠體重增長率的影響及SMI的干預作用。2．流式細胞術檢測(Annexin V/FITC雙染色法)HI對新生大鼠右側海馬神經元凋亡率的影響及SMI的干預作用。3．免疫組織化學方法檢測HI對新生大鼠右側海馬CA1區(qū)神經元Bcl-2、Bax蛋白表達的影響及SMI的干預作用。4．RT-PCR法檢測HI后新生大鼠右側大腦HIF-1amRNA．的

3、表達情況及SMI的干預作用。 結果： 1．HI后14d各組新生大鼠體重增長率統(tǒng)計結果：C組、SM組、P組體重增長率與S組相比有差異(P<0.05)，C組、SM組和P組體重增長率間比較無差異(P>0.05)。 2．HI后神經細胞凋亡率統(tǒng)計結果：HI后2h P組、SM組、C組神經細胞凋亡率已有升高，24h達到高峰，3d開始下降，14d各組神經細胞凋亡率間比較無差異(P>0.05)。P組、SM組、C組神經細胞凋亡率在H

4、I后2h、12h、24h、3d、7d觀察點與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組神經細胞凋亡率在14d、28d觀察點與S組比較無差異(P>0.05)。P組、SM組神經細胞凋亡率在HI后12h、24h、3d、7d觀察點與C組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組神經細胞凋亡率在HI后2h、14d、28d觀察點與C組比較無差異(P>0.05)。P組與SM組神經細胞凋亡率在HI后各觀察點比較無差異(

5、P>0.05)。 3．HI后Bcl-2蛋白表達統(tǒng)計結果：HI后2hP組、SM組、C組右側大腦海馬CA1區(qū)Bel-2蛋白表達已有升高，24h達到高峰，14d各組右側大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達比較無差異(P>0.05)。P組、SM組、C組右側大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達在HI后2h、12h、24h、3d、7d觀察點與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組右側大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達在

6、HI后14d、28d觀察點與S組比較無差異(P>0.05)。P組、SM組右側大腦海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達在HI后24h、3d,7d觀察點與C組比較，Bcl-2蛋白表達較C組高，有差異(P<0.05，P<0.01，)，P組、SM組右側大腦海馬、CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達在HI后2h,14d、28d觀察點與C組比較無差異(P>0.05)。P組與SM組右側大腦海馬CA1區(qū)BcI-2蛋白表達在HI后各觀察點比較無差異(P>0.05)。

7、 4．HI后Bax蛋白表達統(tǒng)計結果：HI后2h P組、SM組、C組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達已有升高，24h達到高峰，14d各組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達無顯著性差異(P>0.05)。P組、SM組、C組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達在HI后2h、12h、24h,3d、7d觀察點與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達在HI后14d、28d觀察點與S組比較

8、無差異(P>0.05)。P組、SM組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達在HI后12h、24h、3d、7d觀察點與C組比較，Bax蛋白表達較C組降低，有差異(P<0.05，P<0.0d)，P組、SM組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達在HI后2h、14d、28d觀察點與C組比較無差異(P>0.05)。P組與SM組右側大腦海馬CA1區(qū)Bax蛋白表達在HI后各觀察點比較無差異(P>0.05)。 5．HI后HIF-1αmRNA表達統(tǒng)計結

9、果：HI后2h P組、SM組、C組右側大腦HIF-1αmRNA表達已有升高，24h達到高峰，14d各組右側大腦HIF-1α表達無差異(P>0.05)。P組、SM組、C組右側大腦HIF-1αmRNA表達在HI后2h、12h、24h、3d、7d觀察點與S組比較有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組、C組右側大腦HIF-1αmRNA表達在HI后14d、28d觀察點與S組比較無差異(P>0.05)。P組、SM右側大腦HIF-1 αm

10、RNA表達在HI后12h、24h、3d、7d觀察點與C組比較，HIF-1αmRNA 表達較C組高，有差異(P<0.05，P<0.01)，P組、SM組右側大腦HIF-1 αmRNA表達在HI后2h、14d、28d觀察點與C組比較無差異(P>0.05)。P組與SM組右側大腦HIF-1 αmRNA表表在HI后各觀察點比較無差異(P>0.05)。 結論：(1) HI后新生大鼠體重增長較慢，SMI對HI后新生大鼠體重增長無顯著影響。(2)