bFGF早期干預(yù)對(duì)新生鼠缺氧缺血性腦損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的；研究堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)對(duì)新生鼠缺氧缺血性腦損傷(hypoxicischemicbraindamage，HIBD)的保護(hù)作用，以及反映新生鼠HIBD后神經(jīng)細(xì)胞再生、突觸重建、神經(jīng)干細(xì)胞激活各項(xiàng)指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化，以期從神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)和行為學(xué)兩方面證實(shí)新生鼠HIBD經(jīng)bFGF早期治療后神經(jīng)系統(tǒng)功能得到改善，為臨床新生兒缺氧缺血性腦病的早期防治提供理論依據(jù)。 方法

2、；通過(guò)結(jié)扎并剪斷7日齡新生Wistar大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈，吸入8％O2+92％N22小時(shí)制備新生鼠HIBD模型，設(shè)置假手術(shù)組、生理鹽水對(duì)照組、bFGF治療組。通過(guò)免疫組化方法和計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)檢測(cè)三組大鼠不同時(shí)點(diǎn)(術(shù)后第4d、7d、10d、17d、24d)海馬CA1區(qū)巢蛋白(Nestin)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)、生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(growth-associatedprotei

3、n，GAP-43)的表達(dá)變化及光鏡下腦組織病理改變；通過(guò)Morris水迷宮(Morriswatermaze)動(dòng)態(tài)觀察三組大鼠學(xué)習(xí)記憶功能。 結(jié)果；1.腦組織病理改變：假手術(shù)組大鼠無(wú)異常病理改變；對(duì)照組大鼠神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死，膠質(zhì)細(xì)胞增生，海馬錐體細(xì)胞層次紊亂、排列松散，術(shù)后第4～7d最重，術(shù)后第10d病理改變逐漸好轉(zhuǎn)；治療組大鼠神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死較對(duì)照組減輕。2.Nestin表達(dá)：各時(shí)點(diǎn)對(duì)照組Nestin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較假手術(shù)組明顯

4、增加，治療組Nestin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加較對(duì)照組更明顯，三組比較差異有顯著性(P＜0.01)；3.GFAP表達(dá)：假手術(shù)組海馬內(nèi)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量和染色強(qiáng)度術(shù)后第7d達(dá)高峰；對(duì)照組GFAP表達(dá)較假手術(shù)組明顯增多，術(shù)后第10d達(dá)高峰，GFAP陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于海馬CA1、CA3區(qū)；治療組GFAP表達(dá)較假手術(shù)組和對(duì)照組明顯增多，術(shù)后第10d達(dá)高峰，第4d、10d、17d三組比較差異有顯著性(P＜0.05)；4.GAP-43表達(dá)：三組新生鼠海馬

5、CA1區(qū)GAP-43表達(dá)均于術(shù)后第10d達(dá)高峰，對(duì)照組和治療組GAP-43表達(dá)較假手術(shù)組明顯升高，其中治療組升高更明顯，三組各時(shí)點(diǎn)比較差異均有顯著性(P＜0.05)。5.Morris水迷宮觀察：對(duì)照組逃避潛伏期(51.75±11.27秒)較治療組(40.32±11.48秒)和假手術(shù)組(36.58±10.83秒)明顯延長(zhǎng)(P＜0.05)；對(duì)照組拆除平臺(tái)后跨越平臺(tái)的次數(shù)(2.34±2.42次)較治療組(5.08±3.86次)和假手術(shù)組(7.

6、03±3.62次)明顯減少(P＜0.05)。 結(jié)論；1.bFGF可減輕新生鼠缺氧缺血性腦損傷后神經(jīng)細(xì)胞的急性水腫、壞死；2.新生鼠缺氧缺血性腦損傷后腦缺血易損傷區(qū)Nestin、GAP-43、GFAP的表達(dá)增加，可能與腦損傷后神經(jīng)再生和軸突重塑有關(guān)；3.給予外源性bFGF治療可增強(qiáng)新生鼠腦缺氧缺血后中樞神經(jīng)系統(tǒng)Nestin、GAP-43、GFAP的表達(dá)，并可明顯改善新生鼠缺氧缺血性腦損傷后的學(xué)習(xí)記憶能力；4.外源性給予bFGF對(duì)新