火龍果種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及繁育研究.pdf

1、分類號(hào)$6679UDC634密級(jí)公開碩士學(xué)位論文火龍果種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及繁育研究吳琳學(xué)科專業(yè)擅物疊透登速堂指導(dǎo)教師黃掛蠶(熬援2論文答辯日期至Q至?xí)兩詫W(xué)位授予日期至Q!晝生互且答辯委員會(huì)主席值逝垡(麴援2火龍果種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及繁育研究摘要為了更好的評(píng)價(jià)和創(chuàng)新利用火龍果種質(zhì)資源，本研究采用SCoT和ISSR兩種分子標(biāo)記對(duì)36份火龍果種質(zhì)資源進(jìn)行了遺傳多樣性分析并對(duì)其中的紅肉、白肉和粉紅肉三種火龍果種質(zhì)資源進(jìn)行了形態(tài)學(xué)鑒定評(píng)價(jià)；并進(jìn)行了扦插繁

2、育和種子發(fā)芽方面的試驗(yàn)研究。主要研究結(jié)果如下：1采用改良的微量CTAB法，建立適合火龍果種質(zhì)資源的基因組DNA提取方法。2采用單因素和正交試驗(yàn)，分別建立了適用于火龍果種質(zhì)資源的ISSR和SCoT分子標(biāo)記的兩套反應(yīng)體系。①ScoTPCR擴(kuò)增反應(yīng)體系，單因素試驗(yàn)初步篩選出來的結(jié)果：模板DNA30ng、引物濃度060gmolL1、dNTP020mmolL～、TaqDNA聚合酶150U。正交試驗(yàn)篩選出的最佳體系：DNA30ng、引物濃度O55斗

3、molL1、dNTP02mmolL1、TaqDNA聚合酶20U。@ISSRPCR擴(kuò)增反應(yīng)體系，單因素試驗(yàn)初步篩選出來的結(jié)果：模板DNA40ng、引物濃度060gmolL～、dNTP濃度O，50mmolL～、TaqDNA’聚合酶250U，正交試驗(yàn)篩選出的最佳體系：DNA50ng、引物濃度O55pmolL1、dNTP06mmol’L1、TaqDNA聚合酶25U。3建立了適用火龍果SCoTPCR擴(kuò)增反應(yīng)的反應(yīng)程序：95℃預(yù)變性5mill；95

4、℃變性40s，50℃退火40s，72℃延伸1mm；共38個(gè)循環(huán)；最后72℃再延伸10mm。4兩種分子標(biāo)記分別篩選出12條引物對(duì)36份火龍果進(jìn)行擴(kuò)增，SCoTPCR擴(kuò)增后共獲得擴(kuò)增位點(diǎn)，156個(gè)：123個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，多態(tài)性百分率達(dá)到7885％，平均每個(gè)引物能產(chǎn)生13個(gè)擴(kuò)增位點(diǎn)，平均多態(tài)位點(diǎn)有1025個(gè)，遺傳相似系數(shù)位于050091之間。ISSRPCR擴(kuò)增后共獲得擴(kuò)增位點(diǎn)，174個(gè)；141個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，多態(tài)性百分率達(dá)到8103％，平均每個(gè)引