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文檔簡介
1、在對蝦養(yǎng)殖中后期,由于大量的投入人工飼料,養(yǎng)殖水體出現(xiàn)有機污染和富營養(yǎng)化狀態(tài),低鹽度的蝦池常會導致藍藻大量繁殖而形成水華,產(chǎn)生的毒素阻礙對蝦的生長。通過野外調(diào)查和毒性脅迫實驗,探究水中藍藻數(shù)量與水質(zhì)因子和藍藻產(chǎn)毒量(微囊藻毒素,MC-LR)的關系,不同氮濃度、磷濃度和氮磷比對顫藻(Oscillatoriasp.)生長和產(chǎn)毒的影響,以及MC-LR對凡納濱對蝦(Litopenaeus Vannamei)免疫酶及相關的基因表達量的影響。主要結(jié)
2、果如下:
1.通過對蝦池進行連續(xù)采樣分析,發(fā)現(xiàn)蝦池中的藍藻主要有螺旋藻(Spirulinasp.),魚腥藻(Anabaena sp.),顫藻(Oscillatoria sp.)、銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosa)等,其中鹽澤螺旋藻的優(yōu)勢度為0.53~0.73。藍藻是水體中的優(yōu)勢微藻種群,藍藻總數(shù)占微藻總數(shù)的88%~99%,藍藻細胞數(shù)為0.99×109~5.89×109 cell/L。蝦池微藻多樣性指數(shù)(H
3、')為1.16~2.49,養(yǎng)殖水體處于中度污染狀態(tài)。溶解性無機氮的含量是0.13~2.30mg/L,正磷酸鹽含量是0.25~2.39mg/L,化學需氧量的含量1.94~13.79mg/L。WC-LR在水中含量為0.18μg/L~0.79μg/L。根據(jù)相關性分析結(jié)果顯示,藍藻總數(shù)與化學需氧量之間呈顯著的正相關關系。表明低鹽度的富營養(yǎng)化的水體能促進藍藻的生長,成為微藻群落中的優(yōu)勢種群。
2.設置不同氮、磷濃度和氮磷比來測定營養(yǎng)鹽對
4、顫藻生長和產(chǎn)毒能力的影響。發(fā)現(xiàn)在不同氮濃度實驗中,當?shù)獫舛取?5.0mg/L時,能促使顫藻的細胞數(shù)量、葉綠素a含量、藻膽蛋白含量、顫藻對水體中氮的吸收利用和毒素含量提高;在不同磷濃度實驗中,當磷濃度≥1.0mg/L時,使顫藻的細胞數(shù)量、葉綠素a含量、藻膽蛋白含量和顫藻對水體中磷的吸收利用提高,但卻降低毒素含量;在不同氮磷比實驗中,當?shù)妆取?5∶1時,使顫藻的細胞數(shù)量、葉綠素a含量、藻膽蛋白含量、顫藻對水體中氮的吸收利用和毒素含量提高。
5、結(jié)果表明水體中營養(yǎng)鹽濃度和比例的變化能顯著影響顫藻生長和產(chǎn)毒能力。
3.在急性染毒實驗中,通過往凡納濱對蝦體內(nèi)注射MC-LR,發(fā)現(xiàn)MC-LR能顯著影響凡納濱對蝦肝胰臟的免疫相關酶活力(P<0.05)。隨著時間增加,超氧化歧化酶、谷胱甘肽過氧化酶、過氧化物酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和溶菌酶的酶活力呈先增加后減小的變化趨勢。超氧化歧化酶、谷胱甘肽過氧化酶和過氧化物酶在染毒后4h達到峰值,分別為123.08 U/mg、59.62 U
6、/mg和29.95 U/mg,比對照組分別增加了15.62%、18.76%和32.86%;而酸性磷酸酶和堿性磷酸酶酶活力在染毒2h即顯著增加,分別為181.76 U/mg和157.90 U/mg,比對照組分別增加了25.02%和37.99%;溶菌酶在染毒8h達到最大值,為28.80 U/mg,比對照組增加了33.57%。表明高劑量的MC-LR能顯著抑制凡納濱對蝦的免疫酶活力。
4.在亞慢性染毒實驗中,通過往水體中釋放不同濃度的
7、MC-LR,30d后發(fā)現(xiàn)MC-LR能顯著影響凡納濱對蝦肝胰臟的免疫相關酶活力及基因表達量(P<0.05)。超氧化歧化酶、谷胱甘肽過氧化酶、過氧化物酶活力均隨著毒素濃度的增加而逐漸增大,毒素濃度為3.0μg/L時達到最大值,分別為250.40 U/mg、125.11 U/mg和7.42U/mg。酸性磷酸酶和堿性磷酸酶活力呈先增加后減小的變化趨勢,當毒素濃度為0.72μg/L時達到最大值,分別為76.97 U/mg和91.56 U/mg。當
8、毒素濃度大于0.50μg/L時,溶菌酶活力隨著毒素濃度的增加而呈現(xiàn)下降的趨勢,毒素濃度為1.47μg/L時達到最小值,為9.69 U/mg。隨著毒素濃度的增加,超氧化歧化酶和谷胱甘肽過氧化酶基因表達水平顯著上調(diào),溶菌酶基因表達水平顯著下調(diào),與相應的酶活力變化相一致。表明水體中長期的低濃度的MC-LR能引起凡納濱對蝦的應激反應,促使對蝦對免疫酶及相關基因進行調(diào)節(jié)以應對毒素的刺激。
以上結(jié)果表明,低鹽度蝦池的富營養(yǎng)化程度的提高會促
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