肝纖維化形成中MMP-1、TIMP-1表達(dá)及益氣軟肝方保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、肝纖維化是慢性肝病重要的病理特征,也是肝損傷向肝硬化進(jìn)展的關(guān)鍵階段.細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成與降解失衡、基質(zhì)重構(gòu)、間質(zhì)型膠原成分Ⅰ、Ⅲ型膠原等異常增多而沉積是肝纖維化的病理基礎(chǔ).基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是一類具有Zn<'2+>依賴性的內(nèi)源性蛋白酶,可降解多種ECM成分,其特異性抑制劑-金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMPs)可對(duì)該酶系活性產(chǎn)生抑制作用.慢性肝損傷時(shí),主要參與降解Ⅰ、Ⅲ型膠原的是MMP-1,如果MMP-1及抑制因子TIMP-

2、1比例失調(diào),會(huì)導(dǎo)致Ⅰ、Ⅲ型膠原降解減少而沉積導(dǎo)致肝纖維化.對(duì)MMP-1、TIMP-1的動(dòng)態(tài)研究有助于顯示它們的作用.中藥為抗肝纖維化的手段之一.益氣軟肝方(PGSL)為大連市中醫(yī)醫(yī)院的經(jīng)驗(yàn)方劑.近40年來(lái),共治療3000余例慢性肝病患者,臨床研究發(fā)現(xiàn)有一定抗肝纖維化、預(yù)防肝硬化的作用.中國(guó)慢性肝病的主要原因是乙肝病毒感染,目前還不能用乙肝病毒制備肝纖維化動(dòng)物模型,有學(xué)者認(rèn)為人血清蛋白(HSA)所引起的大鼠免疫性肝纖維化模型在形態(tài)特征及發(fā)

3、生機(jī)理上與乙肝病毒導(dǎo)致的肝纖維化相似.該論文在上述研究基礎(chǔ)上,應(yīng)用HSA所致的大鼠免疫性肝纖維化模型,在肝纖維化形成的不同時(shí)期同步測(cè)定肝組織MMP-1、TIMP-1蛋白和基因水平的表達(dá),旨在進(jìn)一步了解MMP-1、TIMP-1在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用;觀察PGSL對(duì)肝纖維化的保護(hù)作用,并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討,尤其是其抗肝纖維化作用是否與MMP-1、TIMP-1的變化有關(guān).一、實(shí)驗(yàn)性免疫性肝纖維化形成中MMP-1、TIMP-1的表達(dá)及

4、動(dòng)態(tài)研究;二、PGSL對(duì)大鼠免疫性肝纖維化的保護(hù)和治療作用;PGSL由黃芪50g、白術(shù)20g、丹參25g、川芎10g、桃仁15g、鱉甲30g、生牡蠣50g、炙甘草10g組成.按人鼠用藥比例換算配制.三、PGSL對(duì)肝纖維化大鼠肝組織MMP-1、TIMP-1表達(dá)的影響.PGSL可以降低免疫性肝纖維化大鼠的死亡率,減緩免疫性肝纖維化的進(jìn)程,而且不但抑制了肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展,還對(duì)部分形成的肝纖維化起到阻斷作用.推測(cè)PGSL對(duì)肝纖維化保護(hù)作用的

5、機(jī)制在于,它可以減輕肝損傷,導(dǎo)致TGF-β<,1>表達(dá)減少,以致減少了TGF-β<,1>對(duì)HSC激活的刺激,這可能是HSC激活受到抑制以致ECM分泌減少,肝纖維化減輕的原因之一.在肝纖維化形成過(guò)程中,PGSL的給予可以刺激MMP-1的產(chǎn)生,抑制TIMP-1的分泌,調(diào)節(jié)MMP-1/TIMP-1的比例,以糾正基質(zhì)合成和降解的不平衡,起到抗肝纖維化作用.推測(cè)TIMP-1的減少與HSC激活受到抑制而分泌減少有關(guān),而PGSL的益氣化瘀作用又刺激了