納米鈦酸鈣涂層的鈦合金的制備及體外生物相容性的評(píng)價(jià).pdf

1、目的:通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，對(duì)比純鈦、納米鈦酸鈣、羥基磷灰石三者的生物相容性，為鈦酸鈣涂層鈦合金材料作為新型體內(nèi)植入物的可行性提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:1.MC3T3-E1細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，待細(xì)胞培養(yǎng)穩(wěn)定后，將實(shí)驗(yàn)材料與細(xì)胞一起復(fù)合培養(yǎng)。
　　 2.將實(shí)驗(yàn)材料分成三組，A組（無涂層鈦板TI）;B組（羥基磷灰石涂層鈦板HA-TI）;C組（鈦酸鈣涂層鈦板CTO-TI）各60片滅菌備用。
　　 3.采用成骨細(xì)胞Cal

2、cein-AM+PI+DAPI的熒光染色、MTT法成骨細(xì)胞活性測(cè)定，來評(píng)價(jià)成骨細(xì)胞粘附與增殖。
　　 4.采用成骨細(xì)胞肌動(dòng)蛋白(actin)+β微管蛋白+DAPI的免疫熒光染色、成骨細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)活性測(cè)定，來評(píng)價(jià)細(xì)胞的分化與成熟。
　　 5.采用成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白mRNA表達(dá)、材料表面細(xì)胞生長的掃描電鏡觀察，來評(píng)價(jià)成骨細(xì)胞的成骨鈣化能力。
　　 6.數(shù)據(jù)用x±s表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)

3、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，各組間比較采用單因素方差分析(One-wayANOVE)，多個(gè)樣本均數(shù)間的多重比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果:1.成骨細(xì)胞Calcein-AM+PI+DAPI的熒光染色、MTT法成骨細(xì)胞活性測(cè)定提示:隨著時(shí)間的延長，B、C組材料比A組更加有利于細(xì)胞的增值，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);B組與C組材料比較，兩者對(duì)細(xì)胞毒性相差不大，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.

4、采用成骨細(xì)胞肌動(dòng)蛋白(actin)+β微管蛋白+DAPI的免疫熒光、成骨細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)活性測(cè)定提示:隨著時(shí)間的延長，B、C組材料比A組更加有利于細(xì)胞的分化與成熟(P＜0.05);B組與C組材料兩者之間相差不大(P＞0.05)。
　　 3.成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白mRNA表達(dá)、材料表面細(xì)胞生長的掃描電鏡觀察提示:B、C組材料比A組更加具有成骨礦化能力，促使骨細(xì)胞成骨鈣化，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);B組與C組材料比較，兩者