人參皂苷Rg3聯(lián)合5-Fu對(duì)胃癌荷瘤裸鼠腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及CD133表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　建立裸鼠人胃癌NUGC-4原位移植瘤模型，予人參皂苷Rg3聯(lián)合5-Fu干預(yù)，探討人參皂苷Rg3聯(lián)合5-Fu對(duì)模型鼠遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤組織中CD133表達(dá)的影響以及探討人參皂苷Rg3對(duì)化療后小鼠造血功能的影響。
　　方法:
　　1.利用原位腫瘤移植的方法，將人胃癌NUGC-4瘤株建立在BALB/C裸鼠胃大彎部，觀察腫瘤移植后小鼠生存狀態(tài)。
　　2.按完全隨機(jī)的方法將32只模型裸鼠分為4組，即:生理鹽水組、人

2、參皂苷Rg3組、5-Fu組、Rg3+5-Fu組，每組8只。在原位移植后9d，生理鹽水組給予生理鹽水尾靜脈注射，每只0.2mL/次，Q2d×15;5-Fu組給予5-Fu注射液，標(biāo)準(zhǔn)為20mg/kg，給藥方式為腹腔注射，每周1次，連續(xù)3周;人參皂苷Rg3組以尾靜脈注射的方式給予人參皂苷Rg3，標(biāo)準(zhǔn)為1mg/kg，Q2d×15，Rg3+5-Fu組為上述5-Fu組、人參皂苷Rg3組的聯(lián)合。
　　3.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，拉頸處死所有動(dòng)物，打開每只裸

3、鼠腹腔，收集原位腫瘤組織，稱取腫瘤體重，計(jì)算抑瘤率，觀察每組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的裸鼠數(shù)量，計(jì)算各組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率。
　　4.運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腫瘤組織中CD133的表達(dá)。
　　5.小鼠處死后眼球取血，制作血涂片，高倍顯微鏡下觀察各組血涂片中紅細(xì)胞、白細(xì)胞以及血小板的形態(tài)、排列及分布情況。
　　結(jié)果:
　　1.成功建立胃癌NUGC-4裸鼠原位移植模型，造模后第二周起，可在部分裸鼠上腹部觸及腫塊，質(zhì)地較硬。移植瘤原位移植成功

4、率100％。
　　2.測(cè)定瘤重，計(jì)算抑瘤率。人參皂苷Rg3、5-Fu組、Rg3+5-Fu組的抑瘤率分別為48.6％、69.2％、78.5％，人參皂菅Rg3組、5-Fu組、Rg3+5-Fu組與生理鹽水組比較，移植瘤質(zhì)量有明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.計(jì)算各組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率。人參皂苷Rg3組、5-Fu組、Rg3+5-Fu組的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率均明顯低于生理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Rg3+5-Fu組的

5、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率最低，Rg3組、5-Fu組較生理鹽水組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率也有降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.各組腫瘤組織中的CD133的陽性率分別為:生理鹽水組86.2％，Rg3組36.7％，5-Fu組38.6％，Rg3+5-Fu組26.5％，與生理鹽水組相比，其余3組均能抑制瘤組織中CD133的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，尤其Rg3+5-Fu組與生理鹽水組比較，差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

6、　　5.血涂片結(jié)果顯示5-Fu組血涂片顯示白細(xì)胞比例明顯減少，成熟紅細(xì)胞大小不等，聚集的血小板較少。生理鹽水組和Rg3組涂片中可見數(shù)量較多的白細(xì)胞，成熟紅細(xì)胞形態(tài)基本正常，聚集的血小板成堆可見，且兩組之間的差異不大，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。5-Fu組與生理鹽水組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Rg3+5-Fu組較5-Fu組白細(xì)胞數(shù)量稍多，紅細(xì)胞形態(tài)也較為規(guī)則，聚集的血小板也相對(duì)較多，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果提示，5-Fu對(duì)小鼠造血功能有

7、一定損傷，而聯(lián)合人參皂苷Rg3后可回升小鼠造血功能，說明人參皂苷Rg3對(duì)聯(lián)合化療小鼠造血功能有保護(hù)作用。
　　結(jié)論:
　　1.利用人胃癌NUGC-4瘤株成功建立裸鼠原位移植模型，人參皂苷Rg3聯(lián)合5-Fu對(duì)裸鼠原位移植瘤的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用，同時(shí)能有效降低腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率;
　　2.人參皂苷Rg3聯(lián)合5-Fu化療能有效降低腫瘤組織中CD133的表達(dá)，且腫瘤組織中CD133的表達(dá)與腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān);
　　3.