ALA-PDT聯(lián)合5-Fu抑制裸鼠胃癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究ALA-PDT及其聯(lián)合5-Fu對(duì)人胃癌裸鼠原位移植瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響并探討其可能的作用機(jī)制。 方法：采用完整組織塊法建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型，對(duì)照組每天用生理鹽水腹腔注射，至第8周開腹手術(shù)前靜注ALA，但不施行激光照射；5-Fu組每天腹腔注射5-Fu(劑量為每天30mg/Kg體重)，后續(xù)處理同對(duì)照組；PDT組每天用生理鹽水腹腔注射，至第8周開腹前靜注ALA，開腹后予以氦一氖激光照射腫瘤病灶，激光輸出功率密度為150

2、-200mW/cm<'2>，能量密度135-180J/cm<'2>；聯(lián)合組每天腹腔注射5-Fu，至第8周注射ALA，開腹后激光照射方法同PDT組。上述各組于處理后第3天和第9天分別處死一批動(dòng)物，并測(cè)量腫瘤瘤重和體積，采用TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)，采用免疫組化法檢測(cè)腫瘤組織Survivin、缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)蛋白與微血管密度(MvD)表達(dá)，采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)HIF-1αmRNA表

3、達(dá)。 結(jié)果：第一批裸鼠處死時(shí)對(duì)照組、5-Fu組、PDT組和聯(lián)合組的原位腫瘤瘤重分別為(2.34±0.12)g、(2.02±0.42)g、(1.71±0.39)g和(1.33±0.04)g；AO分別為(3.49±0.28)％、(8.36±0.22)％、(18.52±0.17)％、(29.73±0.56)％；Survivin蛋白表達(dá)率分別為(0.272±0.075)、(0.257±0.074)、(0.128±0.061)、(0.10

4、9±0.053)；聯(lián)合治療組在上述各指標(biāo)上均表現(xiàn)出明顯的抑瘤作用，組間相比差異有顯著性(P<0.05)，且在第二批處死時(shí)聯(lián)合組仍繼續(xù)表現(xiàn)出強(qiáng)而有明顯差異的抑瘤效應(yīng)(P<0.05)。激光照射后3天各組腫瘤組織HIF-1α mRNA染色強(qiáng)度指數(shù)及蛋白表達(dá)率(OD值)分別為(0.722±0.108)％/(0.181±0.046)，(0.655±0.080)％/(0.164±0.034)，(0.926±0.128)％/(0.253±0.052)

5、，(0.463±0.115)％/(0.076±0.017)；VEGF分別為0.114±0.037，0.102±0.034，0.175±0.037，0.048±0.016。PDT組在激光照射后3天上述各指標(biāo)均較對(duì)照組或5-Fu組明顯升高，而聯(lián)合組能下調(diào)這些產(chǎn)物的表達(dá)，并與其他各組有明顯差異(P<0.05)。激光照射后3天各組MvD分別為28.34±7.11，25.58±2.89，39.59±8.39，24.18±9.97，四組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、差異(P>0.05)。 結(jié)論： ①5-Fu，ALA-PDT及兩者合用均可顯著抑制裸鼠體內(nèi)原位移植瘤的增殖生長(zhǎng)，降低腫瘤體積和重量，并通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡使腫瘤凋亡指數(shù)明顯上升。ALA-PDT還能抑制腫瘤細(xì)胞Survivin蛋白表達(dá)，尤其聯(lián)合組在上述指標(biāo)較單用5-Fu或ALA-PDT組作用為強(qiáng)。 ②ALA-PDT可以明顯上調(diào)HIF-1αmRNA及蛋白的表達(dá)，由此引起VEGF蛋白的高表達(dá)。但在聯(lián)合組中HIF-1 α及VE