津力達(dá)改善2型糖尿病大鼠糖脂代謝異常及胰島素抵抗的研究.pdf

1、目的:研究津力達(dá)對(duì)2型糖尿病大鼠糖脂代謝及胰島素抵抗的影響并初步探索其機(jī)制;
　　方法:
　　5周齡Sprague-Dawley大鼠共60只,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(10只)和糖尿病組(50只),糖尿病組以D12451高脂飼料喂養(yǎng)8周后,腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)30mg/kg,對(duì)照組以普通飼料喂養(yǎng)8周后,腹腔注射檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液,腹腔注射后動(dòng)物喂養(yǎng)飼料不變。注射STZ3天及7天后測(cè)定糖尿病組血糖(空腹

2、6h),血糖≥16.7mmol/L為成模2型糖尿病大鼠。成模2型糖尿病大鼠隨機(jī)分為5組:2型糖尿病模型組(簡(jiǎn)稱模型組)、津力達(dá)小劑量組、津力達(dá)中劑量組、津力達(dá)大劑量組、二甲雙胍組,分別以蒸餾水、小、中、大劑量津力達(dá)及二甲雙胍灌胃干預(yù),正常對(duì)照組以蒸餾水灌胃干預(yù)。各組大鼠干預(yù)過(guò)程中,每?jī)芍軝z測(cè)血糖水平,干預(yù)12周后,稱取各組體重及腎周/皮下脂肪比例,采用生化及Elisa法分別測(cè)定各組血糖、糖化血清蛋白、血脂及胰島素水平;采用組織化學(xué)及生化

3、法測(cè)定肝臟脂質(zhì)沉積;采用高胰島素正葡萄糖鉗夾實(shí)驗(yàn)及westernblot法分別測(cè)定葡萄糖輸注率及肝臟、肌肉Akt活化水平反映胰島素敏感性;采用Elisa法檢測(cè)血清、肝臟、脂肪組織炎癥因子水平,RT-PCR法測(cè)定Kupffer細(xì)胞活化水平;采用westernblot、RT-PCR法分別檢測(cè)肝臟中AMPK活化、mTOR活化及自噬水平。
　　結(jié)果:
　　(1)2型糖尿病大鼠與正常組相比,體重?zé)o明顯變化,腎周/皮下脂肪比例有升高趨勢(shì)

4、,血糖及血清TG、TC、FFA較正常組均升高,胰島素水平降低,津力達(dá)及二甲雙胍干預(yù)后,體重及腎周/皮下脂肪比例有降低趨勢(shì),血糖、血清TG降低,TC、FFA有降低趨勢(shì),胰島素水平未見(jiàn)明顯變化,干預(yù)6周時(shí),二甲雙胍組血糖較津力達(dá)各劑量組降低,余各指標(biāo)津力達(dá)組與二甲雙胍組相比未見(jiàn)明顯差異;(2)2型糖尿病組與正常組相比,肝臟內(nèi)TG、FA升高,肝臟HE染色可見(jiàn)多數(shù)肝細(xì)胞內(nèi)脂滴沉積,津力達(dá)及二甲雙胍干預(yù)后肝臟TG均降低,肝臟FA均有降低趨勢(shì),肝臟

5、HE染色均可見(jiàn)肝細(xì)胞內(nèi)脂滴較模型組減少;(3)2型糖尿病模型組大鼠與正常組相比HOMA-IR升高,高胰島素正葡萄糖鉗夾實(shí)驗(yàn)葡萄糖輸注率降低,肌肉、肝臟p-Akt/Akt降低;津力達(dá)及二甲雙胍干預(yù)后,與模型組相比,HOMA-IR均降低,高胰島素正葡萄糖鉗夾實(shí)驗(yàn)葡萄糖輸注率均升高,肌肉及肝臟p-Akt/Akt均升高;津力達(dá)大劑量組高胰島素正葡萄糖鉗夾葡萄糖輸注率較二甲雙胍組增加,余津力達(dá)組與二甲雙胍組相比各指標(biāo)未見(jiàn)明顯差異;(4)2型糖尿病

6、模型組與正常組相比,血清中TNF-α、IL-1β升高、IL-6有升高趨勢(shì)、IL-10有降低趨勢(shì),脂肪組織中TNF-α升高、IL-1β有升高趨勢(shì),肝臟組織中TNF-α升高、IL-1β及IL-6有升高趨勢(shì),肝臟Kupffer細(xì)胞活化標(biāo)志物CD68、F4/80mRNA表達(dá)水平升高;津力達(dá)干預(yù)后,血清中TNF-α、IL-1β下降、IL-6有降低趨勢(shì)、IL-10有升高趨勢(shì),脂肪組織中TNF-α水平降低,IL-1β有下降趨勢(shì),肝臟組織中TNF-α下

7、降、IL-1β、IL-6有下降趨勢(shì),肝臟CD68、F4/80mRNA表達(dá)水平降低;二甲雙胍干預(yù)組后,血清中IL-1β降低、TNF-α及IL-6有降低趨勢(shì)、IL-10有升高趨勢(shì),脂肪組織中炎癥因子水平未見(jiàn)明顯變化,肝臟組織中IL-6降低,CD68、F4/80mRNA表達(dá)水平降低;津力達(dá)組與二甲雙胍組各指標(biāo)未見(jiàn)明顯差異;(5)2型糖尿病模型組與正常組相比,p-AMPK/AMPK降低,p-mTOR/mTOR有升高趨勢(shì),Atg7mRNA降低,L

8、C3B降低;津力達(dá)干預(yù)后,與模型組相比,p-AMPK/AMPK有增高趨勢(shì),p-mTOR/mTOR降低,Atg7mRNA及LC3B蛋白有升高趨勢(shì);二甲雙胍干預(yù)后,與模型組相比,p-AMPK/AMPK升高,p-mTOR/mTOR降低,Atg7mRNA及LC3B蛋白水平升高;二甲雙胍組Atg7mRNA較津力達(dá)組升高;余津力達(dá)組與二甲雙胍組各指標(biāo)未見(jiàn)明顯差異。
　　結(jié)論:
　　2型糖尿病大鼠出現(xiàn)糖脂代謝紊亂、胰島素抵抗的同時(shí),炎癥水