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1、SOOCHOWUNIVERSITY碩士學(xué)位論文論文題目BTG2基因的腫瘤放射增敏作用的研究研究生姓名李敏指導(dǎo)教師姓名樊賽軍(教授)專業(yè)名稱細(xì)胞生物學(xué)研究方向腫瘤放射生物學(xué)論文提交日期2013年5月BTG2基因的腫瘤放射增敏作用的研究基因的腫瘤放射增敏作用的研究中文摘要中文摘要I中文摘要目的:BTG2基因是BTGTOB抗增殖基因家族重要成員之一,作為抗細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡的分子可能是腫瘤治療中一重要的靶向治療基因。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)BTG2
2、在腫瘤放射治療中的影響尚無(wú)任何研究報(bào)道。本課題旨在了解電離輻射對(duì)BTG2表達(dá)水平的影響,以及BTG2基因在腫瘤細(xì)胞放射治療中的作用和可能的相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制,為BTG2作為一新的腫瘤放射治療靶基因的深入基礎(chǔ)研究和臨床研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。方法:采用乳腺癌細(xì)胞MCF7和MDAMB231,前列腺癌細(xì)胞C33A子宮頸癌細(xì)胞HeLa,肺癌細(xì)胞A549等腫瘤細(xì)胞作為研究對(duì)象。(1)采用Westernblot法檢測(cè)電離輻射對(duì)腫瘤細(xì)胞中BTG2蛋白表
3、達(dá)水平的影響。(2)采用pcDNA3BTG2脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法獲得BTG2高表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞MCF7BTG2和MDAMB231BTG2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,利用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)以及細(xì)胞克隆集落形成法了解BTG2表達(dá)水平的提高對(duì)細(xì)胞放射敏感性的影響。(3)采用免疫共沉淀分析方法檢測(cè)BTG2與BRCA1蛋白的相互結(jié)合和作用。(4)采用BRCA1基因真核表達(dá)質(zhì)粒以提高BTG2高表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞BRCA1的表達(dá)水平了解人為提高BRCA1對(duì)
4、BTG2的腫瘤放射增敏作用的影響。采用siRNABRCA1以沉默BTG2高表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞中BRCA1的表達(dá)水平了解人為降低BRCA1對(duì)BTG2的腫瘤放射增敏作用的影響。(5)Westernblot檢測(cè)姜黃素處理后腫瘤細(xì)胞中BTG2的表達(dá)水平。結(jié)果:(1)137Csγ射線照射導(dǎo)致不同腫瘤細(xì)胞包括乳腺癌細(xì)胞MCF7和MDAMB231,前列腺癌細(xì)胞C33A子宮頸癌細(xì)胞HeLa,肺癌細(xì)胞A549腫瘤細(xì)胞中的BTG2蛋白和BTG2mRNA的表達(dá)
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