2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、卵巢癌屬于婦科的惡性腫瘤之一,卵巢癌在婦科的各類腫瘤中的發(fā)病率是在第三位,在子宮頸癌和子宮體癌之下,然而卵巢癌的致死率最高。由于卵巢癌早期診斷困難且轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)率高,所以卵巢癌的五年生存率在幾十年來一直低于40%。目前卵巢癌的臨床治療方案主要是腫瘤切除手術(shù),術(shù)后采用放射療法、化學(xué)療法和生物療法等輔助治療,其中化學(xué)治療是效果很顯著的治療方法。然而,75%的卵巢癌病人被診斷為卵巢癌時已經(jīng)發(fā)展到了晚期階段,而晚期卵巢癌病人的生存概率十分低,因此

2、,我們需要研究新型的卵巢癌治療方案,尋找新的腫瘤治療靶點來攻克卵巢癌。BTG2基因(B-cell translocation gene2)是BTG/TOB抗增殖基因家族中的成員之一。研究表明,BTG2基因可能與腫瘤細胞的增殖、轉(zhuǎn)移以及調(diào)控細胞周期進程相關(guān)。因此,BTG2基因可能是卵巢腫瘤治療的一個靶向基因。
  目的:本課題是通過研究BTG2基因?qū)β殉舶┘毎纳L增殖、轉(zhuǎn)移、細胞周期和順鉑的敏感性的影響及與之相關(guān)的分子機制,為卵巢

3、癌患者從基因水平上提供新的治療靶點。
  方法:1.通過生物信息學(xué)方法分析TCGA數(shù)據(jù)庫中正常的卵巢組織和卵巢腫瘤組織中BTG2的mRNA表達、不同腫瘤分期的患者BTG2基因mRNA的表達水平和BTG2基因表達相對高或低的5年生存曲線。2.采用實時定量RT-qPCR方法來檢測細胞或組織中BTG2基因的mRNA水平的表達水平。3.通過lipofectamin2000脂質(zhì)體包裹BTG2過表達質(zhì)粒和shRNA質(zhì)粒進行細胞的轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染后用

4、G418抗生素篩選得到穩(wěn)定表達的單克隆細胞株。4.采用MTT實驗和克隆形成實驗檢測A2780細胞和SKOV3細胞的生長增殖能力。5.采用流式細胞術(shù)的方法檢測細胞的周期分布情況。6.采用Transwell小室的實驗檢測細胞的遷移能力。7.通過蛋白印跡法檢測細胞中BTG2基因蛋白的表達情況。
  結(jié)果:1.生物信息學(xué)分析結(jié)果表明卵巢腫瘤組織的BTG2基因的mRNA表達水平較正常的卵巢組織低;G2和G3期的卵巢癌病人的BTG2基因的mR

5、NA水平要明顯低于G1期的患者;BTG2基因表達水平高的卵巢癌患者組5年的生存率高于BTG2基因表達水平較低的卵巢癌患者組。2.臨床組織樣本的RT-qPCR結(jié)果表明卵巢腫瘤組織的BTG2基因的mRNA含量較正常的卵巢組織更低。3.MTT實驗和克隆形成實驗說明BTG2基因高表達可以抑制卵巢腫瘤細胞的生長和增殖。4.流式細胞實驗的數(shù)據(jù)表明BTG2基因高表達可以使卵巢腫瘤細胞產(chǎn)生G1期阻滯。5.Transwell小室的實驗數(shù)據(jù)表明BTG2基因

6、高表達可以抑制卵巢腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移能力。6.蛋白印跡法結(jié)果證明BTG2基因通過調(diào)控細胞周期相關(guān)的蛋白Cyclin D1和CDK4的表達水平來影響卵巢腫瘤細胞周期的變化,而BTG2調(diào)控卵巢癌細胞的轉(zhuǎn)移能力是通過抑制轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-2和MMP-9蛋白的表達來完成的。7.qPCR和Western Blot結(jié)果說明了卵巢腫瘤細胞中BTG2的表達含量隨著順鉑濃度增高而的明顯上升,順鉑誘發(fā)的卵巢腫瘤細胞增殖抑制可能是通過BTG2基因調(diào)節(jié)。

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