吳茱萸揮發(fā)油的提取分離、鑒定及抗氧化和抗菌活性研究.pdf

1、吳茱萸為蕓香科吳茱萸屬植物吳茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.、石虎Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吳茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang的干燥近成熟果實(shí)。 吳茱萸為常用中藥，主要用于治療脘腹冷痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、胃痛、腹痛、痛經(jīng)及高血壓等疾病

2、。近代研究證明，其具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗菌、降壓、抗缺氧等藥理作用。揮發(fā)油(精油)，是植物或中草藥中一類(lèi)具有芳香氣味的、在常溫下能揮發(fā)的油狀液體的總稱(chēng)，以萜類(lèi)、倍半萜類(lèi)及其含氧衍生物為主要組成成分，廣泛存在于中藥、香料中，常以含量的高低來(lái)評(píng)價(jià)原料質(zhì)量的優(yōu)劣。對(duì)吳茱萸果實(shí)中揮發(fā)油的提取、化學(xué)組成及生物活性進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究。 1.吳茱萸揮發(fā)油的提取、分離、純化 將吳茱萸揮發(fā)油純化后，配制成溶液，應(yīng)用氣相色譜儀(FID檢測(cè)器)

3、優(yōu)化了氣相色譜分離條件，進(jìn)樣口壓力7.32psi、程序升溫速率8℃/min條件下，分離效果最好。 通過(guò)氣相色譜分析的譜圖比較，發(fā)現(xiàn)石油醚的提取效果較好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出各主要色譜峰相對(duì)保留值的RSD值<1.92％；色譜峰面積的RSD<2.36％，表明儀器精密度良好，樣品測(cè)定具有較好的重現(xiàn)性。另外，比較了同時(shí)蒸餾萃取法、超聲提取法、浸泡提取法及熱回流提取方法在提取效果上的差異。得出結(jié)論：同時(shí)蒸餾萃取法對(duì)吳茱萸揮發(fā)油的提取效果優(yōu)于其它幾

4、種提取方法。 研究比較并優(yōu)化了提取時(shí)間、料液比、樣品粉碎度等提取工藝條件，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在料液比為1:14，提取時(shí)間10h，粉碎度為20～40目(380～830gm)時(shí)，條件最優(yōu)，揮發(fā)油得率為0.31％。 2.吳茱萸揮發(fā)油的化學(xué)成分 用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)結(jié)合Kvoats保留指數(shù)法對(duì)吳茱萸揮發(fā)油的成分進(jìn)行了分析，從吳茱萸揮發(fā)油提取物中分離出70余種化合物，并鑒定出其中的29種，占總含量的71％

5、，主要是：3-蒈烯、α-蒎烯、圣亞麻三烯、4-(1-甲基乙基)-1-環(huán)己烯-1-甲醛、石竹烯、刺蕊草烯、γ-芹子烯、異喇叭烯、1,4-二戊基苯、馬兜鈴烯、δ-杜松烯、檀紫三烯、喇叭烯氧化物II、d-莰烯、十五烷酸甲酯、α-愈創(chuàng)木烯、對(duì)-斯巴醇、柏木烯醇、雪松烯醇、貝殼杉烯、鄰苯二甲酸丁基環(huán)已酯、異丁子香烯、丁子香酚、羅勒烯、6，9-十八碳二烯酸甲酯、黑松烯。 3.吳茱萸揮發(fā)油的抗氧化活性 用K3[Fe(CN)6]體系測(cè)定

6、了吳茱萸揮發(fā)油的還原力；采用羥基自由基體系、超氧陰離子體系、過(guò)氧化氫體系和DNA體系對(duì)吳茱萸揮發(fā)油的抗氧化活性進(jìn)行了研究；在體外，在濃度為2.00mg/mL時(shí)，同蒸提取和回流提取的吳茱萸揮發(fā)油使自由基誘導(dǎo)的大鼠肝線粒體MDA生成的抑制率分別為65.38％和61.54％，對(duì)肝組織勻漿MDA生成的抑制率分別為21.43％和31.90％(無(wú)誘導(dǎo)組)、67.32％和67.07％(Fe2+誘導(dǎo)組)、49.54％和47.43％(H2O2誘導(dǎo)組)；使

7、自由基誘導(dǎo)的大鼠肝線粒體腫脹度低于對(duì)照組。在體內(nèi)，吳茱萸揮發(fā)油具有減少小鼠體內(nèi)肝組織脂質(zhì)過(guò)氧化的作用，在一定的濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出抗氧化作用；同時(shí)也有提高小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力的作用。 4.吳茱萸揮發(fā)油的體外抗菌活性 用濾紙片法測(cè)定了吳茱萸揮發(fā)油的抗菌活性，結(jié)果顯示，在體外，T(同時(shí)蒸餾萃取)和H(回流提取)樣品在10mg/mL濃度下，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌有一定抑制作用，可能與其所含的石竹烯、欖