芳樟葉黃酮和多糖的提取分離、結構鑒定及抗氧化活性研究.pdf

1、我國是世界上生產芳樟油最多的國家，其產量占世界的80％。樟樹是我國生產天然香料芳香油的主要樹種，經濟價值高。近年來，通過組培、扦插等方法培育出純種芳樟，大大提高樟樹資源的經濟價值。但在提取精油過程中產生數(shù)量巨大的芳樟枝葉等廢棄物，由于對芳樟廢棄物的資源化研究力度不夠，忽視了許多有藥用價值的化學成分如黃酮、多糖等化合物的開發(fā)利用，造成芳樟資源浪費嚴重，有必要改進和發(fā)展芳樟中有效成分的提取純化工藝以及尋找其中有生物活性的化學成分，為芳樟資源

2、的綜合利用提供理論與實踐依據(jù)，發(fā)揮其最好的社會效益和經濟效益。 通過對芳樟樹不同部位的測定發(fā)現(xiàn)，不同部位中總黃酮含量和FRAP值均有明顯差異，其中芳樟葉的總黃酮含量和FRAP值最高。不同部位中總黃酮含量與FRAP值呈正相關性。高效液相色譜法(HPLC)測定結果表明芳樟葉中黃酮苷元主要含有槲皮素、山奈素和異鼠李素，其含量分別為：0.39％、0.14％和0.063％，在芳樟葉中大部分以黃酮糖苷的形式存在。 通過單因素實驗和正

3、交試驗優(yōu)化了芳樟葉黃酮的微波輔助萃取工藝條件：乙醇濃度60％(v/v)，料液比1：12(g/mL)，微波功率320 W，間歇輻射兩次，每次1 min，芳樟葉黃酮提取得率達2.97％，比乙醇熱回流提取提高了6.83％，并且提取時間縮短了近99％；為了進一步純化芳樟葉黃酮，通過測定10種大孔樹脂對芳樟葉黃酮的靜態(tài)吸附量和解吸率，確定了芳樟葉黃酮純化工藝的吸附劑DA201樹脂，并優(yōu)化了DA201樹脂對芳樟葉黃酮的動態(tài)吸附和解吸工藝條件：上柱液

4、黃酮濃度為13.20 mg/mL，樹脂柱徑高比為1：10，吸附流速為3 BV/h；洗脫溶劑為5 BV50％的乙醇水溶液，洗脫流速為3 BV/h。芳樟葉粗提液經裝填有大孔樹脂DA201的固定床純化后黃酮含量由38.15％提高到91.18％，純化倍數(shù)2.39倍。 采用HPLC法測定芳樟葉精制黃酮中蘆丁、槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量，分別為123.33 mg/g、70.00 mg/g、28.63 mg/g和20.81 mg/g。利用

5、高效液相色譜—二極管陣列檢測器—電噴霧質譜(HPLC—DAD—ESI—MS)聯(lián)用技術對芳樟葉精制黃酮的主要組分進行了定性分析，初步鑒定出蘆丁、槲皮素—3—O—β—D—半乳糖苷、山奈酚—3—O—β—D—蕓香糖苷、異鼠李素—3—O—β—D—蕓香糖苷、槲皮素—3—O—β—D—鼠李糖苷、山奈酚—3—O—β—D—鼠李糖苷6種黃酮糖苷。采用Sephadex LH-20凝膠柱從精制黃酮中分離得到蘆丁和山奈酚—3—O—B—D—蕓香糖苷。 進一步

6、采用沸水提取、乙醇沉淀的方法，從芳樟葉中提取得到水溶性粗多糖CLPS。經DEAE52—纖維素柱和Sephacryl—S400凝膠柱分離得到一種酸性多糖組分CLPS—A2，采用高效凝膠滲透色譜法測定其為均一性多糖，平均分子量為244KOa。紫外可見吸收光譜和紅外光譜的分析結果表明CLPS—A2為具有乙酰氨基結構的β型吡喃多糖。CLPS—A2水解產物的分析結果顯示，CLPS—A2是一種主要由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖組成的酸性雜