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文檔簡介
1、目的:建立一種理想的重癥急性胰腺炎(SAP)動物模型。觀察SAP大鼠脾臟組織中核因子kB(nuclear factor-kB)的表達,探討脾臟在SAP的發(fā)病中的作用。 方法:1)SD大鼠隨機分成實驗組(SAP)(n=24)和假手術(shù)組(n=24),細(xì)針逆行胰膽管注射4%?;悄懰徕c建立SAP模型,采集腹水,3,6,12小時采血測定血清淀粉酶,取胰腺體部標(biāo)本予4%甲醛固定后制作石蠟切片HE染色進行光鏡病理組織學(xué)觀察.胰腺組織根據(jù)Ron
2、gine標(biāo)準(zhǔn)進行病理嚴(yán)重度評分。2)96只SD大鼠隨機分成4組:假手術(shù)組,脾切除組,SAP組,脾切除+SAP組。制模后3,6,12h分批處死動物,取血樣和標(biāo)本待以下檢測:HE染色光鏡下觀察胰腺組織病理改變并進行病理學(xué)評分。用酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)進行血清TNF-α測定。采用免疫組織化學(xué)方法檢測大鼠脾臟NFkBp65活化表達水平。 結(jié)果:1)SAP組3,6,12小時觀察胰腺組織具有不同程度的出血壞死改變,其胰腺病理學(xué)評分
3、、血清淀粉酶水平、腹水含量均較假手術(shù)組明顯升高,差異有顯著性。2)血清TNF-α濃度測定結(jié)果:制模后SAP組和脾切+SAP組在不同時點血清的濃度均比對照組明顯升高(P<0.05),脾切除+SAP組在6,12hTNF-α濃度明顯低于SAP組,差異有顯著性。SAP組在不同時點之間比較,差異均有顯著性,表現(xiàn)為隨時間延長而升高。脾切+SAP組3,6h及6,12h比較,差異無顯著性。脾切除+AP組6h,12h胰腺病理學(xué)評分均低于AP組(6h 7.
4、83±0.753,vs 9.67±1.211 12h 9.67±0.816,vs 13±0.894)(P<0.01);AP大鼠模型中脾臟NFkBp65活化陽性表達3h(46.967±1.148)即明顯,6h(56.333±1.588)最強,12h(36.900±0.756)表達減弱,與假手術(shù)組相應(yīng)時點差異均有顯著性。 結(jié)論:制作穩(wěn)定的操作平臺,逆行膽胰管注射4%?;悄懰徕c誘導(dǎo)的SAP大鼠模型是可成功地誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎,具有創(chuàng)傷
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