蘭州百合不同外植體培養(yǎng)及其優(yōu)化研究.pdf

1、蘭州百合屬川百合的變種，是多年生草本植物，營(yíng)養(yǎng)豐富，品質(zhì)極佳，以名菜良藥著稱全國(guó)，是百合中的佼佼者。關(guān)于百合的組織培養(yǎng)，目前有大量的報(bào)道，但是關(guān)于蘭州百合的組織培養(yǎng)，報(bào)道較少，尤其是蘭州百合的幼胚離體培養(yǎng)目前尚未報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)分別在無(wú)性系的建立，繼代增殖培養(yǎng)，生根培養(yǎng)三個(gè)階段選用蘭州百合的鱗片、根、葉片、胚作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)的研究。 篩選出適合蘭州百合離體培養(yǎng)的最佳滅菌方式：飽和洗衣粉-無(wú)菌水沖洗-70％無(wú)水乙醇處理1-2分鐘

2、-無(wú)菌水沖洗-15％84消毒液處理15分鐘-0.1％升汞處理5-6分鐘-無(wú)菌水沖洗3遍。用同樣的滅菌方式對(duì)蘭州百合鱗片的內(nèi)層，中層，外層進(jìn)行滅菌，內(nèi)層易滅菌，外層鱗片最不易滅菌。 在進(jìn)行初代培養(yǎng)的過(guò)程中，蘭州百合以鱗片為外植體的初代培養(yǎng)過(guò)程中，最佳培養(yǎng)基為MS+1.0mg/LBA+0.2 mg/L NAA，低溫處理對(duì)鱗片的初代培養(yǎng)分化率明顯的高于未經(jīng)過(guò)低溫處理的鱗片。蘭州百合以根為外植體的初代培養(yǎng)的過(guò)程中，最佳培養(yǎng)基為：MS+2

3、.0mg/L BA+0.2mg/L NAA，MS+2.0mg/L NAA。蘭州百合以葉片為外植體的初代培養(yǎng)的過(guò)程中，最佳培養(yǎng)基為：MS+1.0mg/L BA+0.2mg/L NAA，MS+1.0mg/L BA+0.1 mg/LNAA。以蘭州百合幼胚為外植體的初代培養(yǎng)，通過(guò)生物統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有初代培養(yǎng)成功的幼胚，均屬于隨機(jī)出現(xiàn)，與培養(yǎng)基沒(méi)有直接關(guān)系。并且低溫處理對(duì)胚的萌發(fā)沒(méi)有影響。相同的培養(yǎng)基，當(dāng)蔗糖的濃度達(dá)到60％時(shí)，幼胚的萌發(fā)率高達(dá)5

4、0.7％。 在進(jìn)行增殖培養(yǎng)過(guò)程中，蘭州鱗片增殖培養(yǎng)基中最佳培養(yǎng)基為MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA，蘭州百合葉片增殖培養(yǎng)基中最佳培養(yǎng)基為MS+2.0 mg/L BA+0.4 mg/L NAA。蘭州百合根增殖培養(yǎng)基中最佳培養(yǎng)基為MS+1.5mg/L BA+0.5mg/L NAA，較適合蘭州百合胚成苗的培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA。 在進(jìn)行生根培養(yǎng)的過(guò)程中，鱗片生成的不

5、定芽進(jìn)行生根結(jié)鱗莖的培養(yǎng)中最佳培養(yǎng)基為1/2 MS+0.2 mg/L NAA+蔗糖60g/L ，根生成的不定芽進(jìn)行生根結(jié)鱗莖的培養(yǎng)中最佳培養(yǎng)基為1/2 MS+0.3 mg/L NAA+蔗糖60g/L，葉片生成的不定芽進(jìn)行生根結(jié)鱗莖的培養(yǎng)中最佳培養(yǎng)基為1/2 MS十0.3mg/L NAA+蔗糖60g/L 。 初代培養(yǎng)基對(duì)外植體分化的影響：鱗片下部的分生能力極顯著的高于其他部位。葉片基部的分生能力極顯著的高于葉片的中段和葉尖。來(lái)自于