三種免疫抑制劑和辛伐他汀對血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及其分泌內(nèi)皮素的影響.pdf

1、研究目的： 研究環(huán)磷酰胺(CTX)、沙利度胺(THAL)、白芍總甙(TGP)和辛伐他汀(SVT)對體外培養(yǎng)的EA.hy926內(nèi)皮細(xì)胞(EC)增殖的影響，以及對其分泌的內(nèi)皮素(ET-1)水平的影響，并研究環(huán)磷酰胺和辛伐他汀對內(nèi)皮細(xì)胞ET-1基因表達(dá)的影響。 研究方法： 以四氮唑藍(lán)染色法(MTT)比較環(huán)磷酰胺、沙利度胺、白芍總甙和辛伐他汀對內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響；采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測各種藥物作用后內(nèi)皮

2、細(xì)胞培養(yǎng)液中ET-1水平的變化；用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的方法檢測環(huán)磷酰胺和辛伐他汀對內(nèi)皮細(xì)胞ET-1基因表達(dá)的影響；對實驗結(jié)果采用SPSS統(tǒng)計軟件(11.5)進(jìn)行分析。 研究結(jié)果： 1.MTT法顯示：CTX對EC的增殖有抑制作用，并隨著作用時間延長而增加，在作用72h時抑制呈濃度依賴性，濃度為2000、500和150μmol/l時的抑制率分別為44.28％、22.7％和 21.55％(p<0.05)；THAL對EC的增殖

3、無明顯作用，且隨時間延長而變化不大；TGP對EC的增殖有抑制作用，并隨著作用時間延長而增加，在作用72h時抑制呈濃度依賴性；SVT在作用24h時對EC的增殖有促進(jìn)作用，濃度為10、5和2μmol/l時抑制率分別為-14.37％、-21.57％和-21.67％(p<0.05)，隨著SVT作用時間延長對EC的增殖呈抑制作用，72h時，濃度為10μmol/l和5μmol/l時抑制率分別為57.14％和 8.71％(p<0.05)。 2

4、.ELISA法顯示：與PBS溶劑對照組相比，CTX濃度為1000、150和50μmol/l時，可以顯著抑制EC分泌ET-1，抑制率分別為18.59％、14.77％和13.72％(P<0.05)；與HPCD溶劑對照組相比，THAL濃度為10μmol/l時，可以顯著抑制EC分泌ET-1，抑制率為27.75％(P<0.05)，THAL各濃度均與DMSO溶劑對照組無顯著性差異；與乙醇和PBS混合液溶劑對照組相比，TGP濃度為36μg/ml時可以

5、顯著促進(jìn)EC分泌ET-1；與無水乙醇溶劑對照組相比，SVT濃度為10μmol/l和5μmol/l時，可以顯著抑制EC分泌ET-1的水平，抑制率分別為77.92％和78.72％(P<0.05)。 3．RT-PCR顯示： CTX的濃度為2000、1000、500和50μmol/l時，ET-1/GAPDH的比值低于溶劑對照組，表明其可以抑制ET-1基因表達(dá)；SVT(10μmol/1和5μmol/l)可以明顯抑制ET-1的基因表達(dá)。但均