白介素8在兔腹主動脈球囊擴張術后血管炎性反應中的作用.pdf

1、目的：隨著社會的進步和人民生活水平的提高，冠心病已成為全球范圍內威脅人類生命的首要致死性疾病。經皮腔內冠狀動脈成形術(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)作為治療冠心病的主要手段，在臨床上得到了越來越廣泛的應用，然而介入治療術后再狹窄的發(fā)生在很大程度上影響了其遠期效果。對于介入治療術后再狹窄機制的研究發(fā)現(xiàn)，血管內皮細胞過度增生及血管平滑肌細胞(VSMCs)的增殖、遷移是

2、發(fā)生再狹窄的主要原因。研究表明,炎性反應在血管再狹窄過程中起重要作用。闡明血管損傷后參與炎性反應的各個炎性因子之間的關系與作用規(guī)律，對于血管性疾病的發(fā)病機制研究和血管成形術后主要并發(fā)癥的防治等方面均有重要的意義。本研究通過測定兔腹主動脈球囊擴張后各時間點白細胞介素8(Interleukin-8,IL-8)、白細胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)

3、和 C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)水平變化情況，探討兔腹主動脈球囊擴張后炎性因子水平變化的規(guī)律，闡明其作用機制，并對干預血管再狹窄這一病理過程提供了新的角度，有必要進行深入的研究。
　　 方法：選取9-14月齡新西蘭大白兔16只，全部為雄性動物，體重2.50-3.25kg，實驗前均適應性飼養(yǎng)5-7d，均單籠、低脂飼料飼養(yǎng)，由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供，實驗后繼續(xù)單籠、低脂飼料喂養(yǎng)。以上動物隨機分為實

4、驗組(experiment group)和對照組(control group)，每組各 8只動物。以 10g/L 戊巴比妥鈉 3.0-3.5ml/kg 耳緣靜脈注射麻醉實驗動物，常規(guī)消毒鋪巾后，采用Seldinger技術穿刺股動脈并留置鞘管，經鞘管注入普通肝素200 單位抗凝，沿導引鋼絲逆行插入球囊，造影后將球囊定位，置于髂動脈以上2個椎體處，以 405.30～607.95 kPa 壓力擴張球囊，同時注射造影劑證實球囊完全擴張堵閉腹主動

5、脈，自近心端緩慢回拉(拉傷長度3-4cm)，反復3次，每次擴張時間20秒，間隔15秒，造成球囊擴張拉傷兔腹主動脈。對照組動物術前準備及麻醉方法同實驗組，但只進行股動脈穿刺留置鞘管，不進行球囊拉傷。分別于實驗前，實驗后4小時、1天、1周、2周、4周耳緣靜脈采血5ml，以3000r/min離心20min 后，取上清液得血清標本，-80℃冰箱統(tǒng)一保存。4周后處死動物前復查造影，進行病理檢查觀察組織學變化。通過酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法測定兔腹主動脈

6、球囊擴張后各時間點IL-8、IL-6、TNF-α和CRP水平變化情況，探討兔腹主動脈球囊擴張后炎性因子水平變化的規(guī)律，闡明其作用機制。所有數(shù)據輸入SPSS13.0統(tǒng)計軟件包，研究數(shù)據中計量資料以(±s)表示，兩組間比較使用t檢驗，計數(shù)資料使用χ2檢驗，相關資料采用相關分析法計算相關系數(shù)，以p<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：1.4周后造影檢查，發(fā)現(xiàn)實驗組動物腹主動脈拉傷處出現(xiàn)明顯狹窄，而對照組動物無明顯變化。病理檢查結

7、果：肉眼觀察對照組動物動脈柔軟、有彈性,顏色粉紅均勻,管腔內膜較光滑。實驗組動物腹主動脈拉傷處外觀粗細不均勻,管壁明顯僵硬。取材后見管壁增厚,光鏡下形態(tài)學觀察：對照組兔腹主動脈血管壁內膜、中膜、外膜三層結構明顯，內膜完整、無增厚，內皮下無脂質沉積，中膜平滑肌細胞細長呈梭形，細胞核藍染，同心圓狀排列整齊；實驗組兔腹主動脈管腔狹窄，內膜明顯增厚，中膜平滑肌細胞排列紊亂，單位面積細胞核數(shù)量增多。
　　 2.兩組動物之間一般情況分析：兩

8、組動物月齡、術前體重、術后體重、穿刺徑路、術前后血脂水平(包括 TG,TC,LDL-C,HDL-C)等一般情況相比，差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)，兩組動物具有可比性。
　　 3.兩組動物實驗前后IL-8等炎性因子水平變化情況：實驗前兩組動物IL-8、IL-6、TNF-α、CRP 等水平比較，差異無統(tǒng)計學意義。實驗組動物球囊損傷后4小時IL-8水平即開始升高，與對照組以及術前水平比較有顯著性差異(p<0.01)，術后 1天達到

9、峰值水平，持續(xù)升高至第4周。IL-6、TNF-α、CRP水平于術后24小時開始升高，IL-6、CRP術后1周達到峰值水平，TNF-α術后2周達到峰值，與對照組以及術前水平比較有顯著性差異(p<0.01)。上述炎性因子持續(xù)增高4周，均明顯高于對照組(p<0.01)。對照組上述炎性因子無此變化趨勢。
　　 4.相關性分析：IL-8水平與 IL-6、TNF-α、CRP水平呈正相關，相關系數(shù)r分別為0.769，0.673，0.897(p