神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體在形覺(jué)剝奪性近視中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、鄭州大學(xué)博士學(xué)位論文神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體在形覺(jué)剝奪性近視中作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：陳悅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：張金嵩20070515鄭州大學(xué)博士研究生論文 神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體在形覺(jué)剝奪性近視中作用的實(shí)驗(yàn)研究然后研究T F D M 發(fā)展過(guò)程中視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞是否也存在細(xì)胞凋亡現(xiàn)象及凋亡基因p 7 5 N T R 、C a s p a s e 一3 蛋白和m R N A 表達(dá)的變化，并觀(guān)察了N G F 對(duì)視網(wǎng)膜細(xì)胞的保護(hù)作用

2、，探索治療高度近視的新途徑。最后研究了N G F 對(duì)體外培養(yǎng)的人鞏膜成纖維細(xì)胞的影響。第一部分神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體在豚鼠形覺(jué)剝奪性近視的表達(dá)方法1 ．動(dòng)物模型的建立：選用出生7 天花色豚鼠8 0 只。隨機(jī)分為4 組，每組2 0 只。A組( 遮蓋2 周) ，B 組( 遮蓋4 周) ，C 組( 遮蓋8 周) ，D 組( 遮蓋7 周去遮蓋1 周) 。每組1 0 只用于H E 染色及免疫組織化學(xué)檢測(cè)，另1 0 只用于R T —P C R 檢測(cè)。

3、右眼以半透明眼罩遮蓋作為遮蓋眼，左眼不做任何處理為對(duì)照眼。2 ．屈光度及眼軸長(zhǎng)度測(cè)量：分別于遮蓋前、遮蓋后2 周、4 周、8 N 及遮蓋7 周去遮蓋1 周，檢影鏡檢測(cè)豚鼠雙眼屈光狀態(tài)，A 型超聲儀測(cè)定雙眼軸長(zhǎng)度。3 ．H E 染色與形態(tài)學(xué)觀(guān)察：光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察遮蓋前后視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)變化。4 ．免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)：N G F 蛋白、T r k A 蛋白表達(dá)。5 ．逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)( R T - P C R ) 檢測(cè)：視網(wǎng)膜N G Fm

4、R N A 、T r k Am R N A 的表達(dá)。6 ．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用S P S S l 2 ．O 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x + s ) 表示，雙眼比較采用配對(duì)t 檢驗(yàn)，組問(wèn)比較采用單因素方差分析，取a = O ．0 5 作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果1 ．遮蓋眼與對(duì)照眼屆光度及眼軸比較：遮蓋眼由實(shí)驗(yàn)前遠(yuǎn)視眼演變?yōu)榻曆?，并隨遮蓋時(shí)間延長(zhǎng)，近視度數(shù)加深，眼軸延長(zhǎng)。遮蓋8 周，遮蓋眼屈光度( 一4 ．3 8

5、77;1 ．1 1 ) D 與對(duì)照眼( 3 ．7 5 ±O ．7 1 ) D 相比，眼軸長(zhǎng)( 8 ．1 8 ±0 ．1 6 ) m 與對(duì)照眼( 7 ．2 6±O ．2 0 ) 咖相比屈光度前后變化為8 ．1 3 D ，眼軸前后變化為0 ．9 2 m m ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( 尸< O ．0 1 ) 。遮蓋7 周去遮蓋1 周屈光度前后變化為5 ．9 1 D ，眼軸前后變化為0 ．5 2 n l n 。去