Ang-1及其受體Tie-2在哮喘大鼠氣道中的表達.pdf

1、支氣管哮喘(以下簡稱哮喘)的基本特征是由嗜酸性粒細胞、肥大細胞、淋巴細胞等多種細胞及細胞組份引起的慢性氣道炎癥,同時氣道形態(tài)的變化反映了其結構的變化,即氣道重塑(airway remodeling).現(xiàn)在已被人們共同認可,它包括上皮細胞的脫落,基底膜的增厚,血管的擴張和增殖,氣道平滑肌的增殖,黏液腺和杯狀細胞的增生、膠原的沉積.血管從原始的管腔變成各級由內皮細胞和血管周細胞及平滑肌細胞組成的網(wǎng)絡的過程中,促血管生成素-1(angiopo

2、ietin-1,Ang-1)及其受體 Tie-2起著非常重要的作用.Ang-1是肌肉分泌型配體,在生理性和病理性血管生成過程中都起著重要作用.據(jù)報道Ang-1能調控內皮細胞黏附分子與細胞之間的連接,還能阻止由血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)或炎性介質引起的血管滲漏從而發(fā)揮抗炎作用.也能夠通過內皮特殊受體 Tie-2活化磷酸二酯酶,磷酯酰肌醇.3 激酶和酪氨酸激酶,顯著抑制

3、VEGF引起的嗜酸性粒細胞的趨化.因此,Ang-1可能對與炎癥所致的微血管滲漏有治療意義. 在Ang家族中,有四種形式,分別是Ang-1,Ang-2,Ang-3,Ang-4,Ang-1廣泛表達在成人多種組織中.目前大多研究集中在Ang-1和Ang-2.Tie是血管內皮細胞上特異的酪氨酸激酶型受體,包括Tie-1、Tie-2兩種,由于尚未發(fā)現(xiàn)Tie-1受體的配體,所以目前大多數(shù)研究都集中在Tie-2受體.Tie-2主要表達在血管內

4、皮細胞(endothelial cells,ECS)和早期造血細胞.目前國內尚未見到研究Ang-1及其受體Tie-2在哮喘中的作用,國外也剛剛開始.本實驗中通過激發(fā)復制哮喘模型,采用免疫組化(immnohistochemical)方法檢測Ang-1及其受體Tie-2在正常組、哮喘組及干預組不同組間氣道壁表達變化,采用計算機病理圖象分析系統(tǒng)分析各組大鼠氣道壁厚度與上述兩因子之間的關系,旨在探索.Ang-1及其受體tie-2在哮喘病理生理發(fā)

5、展過程中的作用,從而為哮喘氣道重塑的治療和預防提供新的思路.材料和方法將45只健康雌性SD大鼠(體重110±10g,5-6周齡),隨機分為以下各組:(1)對照組:腹腔注射1ml生理鹽水,并吸入生理鹽水.(2)模型組:制備哮喘模型,OVA(雞卵白蛋白)致敏,1﹪OVA激發(fā).第1d每只大鼠腹腔注射1ml10﹪OVA混懸液(內含1ml生理鹽水,100mg氫氧化鋁,100mgOVA)致敏,第8 d、15d各重復一次,第16d始用OVA激發(fā),將大

6、鼠置于特制密閉玻璃容器中,用超聲霧化器噴入1﹪OVA,隔日一次,每次20min,激發(fā)20次.(3)地塞米松干預組:激發(fā)前30min,按2mg/kg腹腔注射地塞米松溶液,其他同模型組.各組大鼠分別于末次激發(fā)后24h內用苯巴比妥鈉腹腔麻醉(100mg/只)處死.HE染色觀察氣道結構,免疫組化染色后,采用計算機病理圖象分析系統(tǒng)分析各組大鼠氣道壁表達Ang-1及其受體Tie-2陽性百分數(shù),在10×20下測氣道壁厚度,分析Ang-1及Tie-2與

7、氣道壁厚度兩者之間的關系,統(tǒng)計分析均采用SPSS(11.0)統(tǒng)計軟件進行計算,結果以算術平均數(shù)±標準差(x+s)表示.各組資料經(jīng)方差齊性檢驗后采用單因素方差分析法(one-way ANOVA),并進行直線相關分析,以α=0.05為檢驗水準,P<0.05為差異具有顯著性.結果1.各組所測得的氣道的厚度與對照組比較,模型組(47.266±2.531)和干預組(39.267±2.011)氣道壁厚度較對照組(36.533±2.166)顯著增加(

8、P<0.01),模型組(47.266±2.531)較干預組顯著增加(P<0.01).2.Ang-1及其受體Tie-2在大鼠氣道壁的表達在對照組及干預組,Ang-1及其受體Tie-2相對弱表達于氣道上皮細胞,平滑肌細胞和血管內皮細胞等.而在模型組中,Ang-1及其受體Tie-2則強表達于氣道上皮細胞,平滑肌細胞和血管內皮細胞等. Ang-1模型組(103.9487±8.2914)與對照組(76.0320±3.7728)及干預組(9

9、0.6180±5.2339)比較,表達均顯著增加(P<0.01),干預組與對照組比較也顯著增加(P<0.01). Tie-2模型組(99.2307±8.1913)與對照組(75.3153±3.7321)及干預組(86.6633±3.7321)比較,表達均顯著增加(P<0.01),干預組與對照組比較也顯著增加(P

10、氣道壁厚度呈明顯正相關(r<,Ang-1>=0.719,r<,Tie-2>=0.746,P<0.01),Ang-1與其受體Tie-2間也呈明顯正相關(r<,Ang1-Tie-2>=0.742,P<0.01). 結論 1.Ang-1及其受體Tie-2在氣道中廣泛表達. 2.哮喘模型大鼠氣道壁中Ang-1及其受體Tie-2表達明顯上調,且與氣道壁厚度密切相關. 3.Ang-1及其受體Tie-2可能抑制哮喘氣道