性別決定技術(shù)在銀狐養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用研究.pdf

1、狐貍屬于哺乳綱，食肉目，犬科動(dòng)物。我國(guó)的狐貍養(yǎng)殖業(yè)主要分布在北方較寒冷的地區(qū)，如:河北、山東、內(nèi)蒙古、東北等地。銀狐又叫銀黑狐，是赤狐的一種基因突變種，被毛呈黑白相間，且有一層霧狀形的針毛，是人們飼養(yǎng)的珍貴毛皮動(dòng)物主要品種之一。安徽省皖北有多家狐貍養(yǎng)殖企業(yè)，這些企業(yè)在狐貍養(yǎng)殖過(guò)程中，一般采用的是自然繁殖的方式，狐貍發(fā)情期短，一年只有兩個(gè)個(gè)月左右的發(fā)情期，并且繁殖率低，每胎只能產(chǎn)2-3只后代，自然繁殖方式難以滿足狐貍養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)高速擴(kuò)大再生產(chǎn)

2、的需要。隨著人工授精技術(shù)的發(fā)展，授精技術(shù)越來(lái)越成熟，雖然繁殖率得到了大大的提高，但相比貉子等皮毛動(dòng)物產(chǎn)率仍然低很多，加之保胎也困難很多，怎樣提高養(yǎng)狐業(yè)的繁殖率，這是最受人們關(guān)注的。養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中母狐的需求量往往不能被滿足，提高母狐的產(chǎn)量是養(yǎng)殖廠擴(kuò)大再生產(chǎn)的關(guān)鍵。如果能在受精前做好性別分離，將會(huì)大大節(jié)約資源和時(shí)間，提高性別控制與鑒定和胚胎移植的效率。
　　本文以皖北銀狐為研究對(duì)象，探究皖北銀狐精子發(fā)生的過(guò)程與季節(jié)影響、皖北銀狐的精液品質(zhì)

3、、提高精子常溫液態(tài)保存效果、輸精前對(duì)X精子進(jìn)行篩選，從這幾環(huán)節(jié)來(lái)提高狐貍的繁殖率，最終通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，將性別決定技術(shù)應(yīng)用在銀狐養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)。為銀狐人工繁殖受精率奠定基礎(chǔ)，進(jìn)而滿足狐貍養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)擴(kuò)大再生產(chǎn)的需要。通過(guò)研究得出的結(jié)論主要有以下幾個(gè)方面:
　　1.分析了季節(jié)對(duì)皖北地區(qū)銀狐精子發(fā)生的影響，表明精子發(fā)生呈現(xiàn)典型的季節(jié)性，從而確定了采集公狐精液的最佳時(shí)間段。以9月、11月、次年1月份的銀狐睪丸為研究對(duì)象，測(cè)量睪丸的重量、體積等基礎(chǔ)形態(tài)

4、參數(shù)以及采用酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)睪丸中睪酮的含量。利用組織切片技術(shù)分析曲細(xì)精管中各類生精細(xì)胞的組成及比例。結(jié)果:9月、11月、次年1月銀狐睪丸的重量分別為0.896±0.002g、3.365±0.081 g、5.241±0.100 g，體積分別為1.215±0.036 cm3、5.558±0.794cm3、14.112±2.8543 cm3，睪酮含量分別為1.215±0.036μg、5.558±0.794μg、14.112±2.8543μg。

5、結(jié)果表明，不同月份銀狐睪丸的體積、重量以及睪酮含量有顯著差異(P＜0.05)，并且睪丸中睪酮的含量與重量的變化呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.991。切片上曲細(xì)精管中生精細(xì)胞的組成、數(shù)量隨著季節(jié)變化也呈現(xiàn)不同，差異性顯著(P＜0.05)。
　　2.從分析皖北銀狐精液品質(zhì)入手，配制了一種安全、高效、經(jīng)濟(jì)的銀狐精子稀釋液，延長(zhǎng)了精子在體外的存活時(shí)間，提高了人工授精時(shí)母狐的受孕率和單胎產(chǎn)胎數(shù)。結(jié)果顯示，皖北銀狐的射精量在0.5-1.5 ml/次

6、，精子密度在5億/ml左右。母狐子宮的精子容納量為0.5 ml左右。實(shí)驗(yàn)證明將精液進(jìn)行稀釋，稀釋5倍左右并不會(huì)對(duì)受孕率以及受孕胎數(shù)造成影響，而稀釋液質(zhì)量的好壞則直接影響精子的活率和活力，進(jìn)而影響銀狐繁殖率。本研究配制了一種優(yōu)質(zhì)銀狐常溫保存的精子稀釋液。以貂、人等其他動(dòng)物精子稀釋液成分為基礎(chǔ)，配制出三種液態(tài)保存精子稀釋液，在細(xì)胞水平上觀測(cè)稀釋液的保存效果，確定了最優(yōu)的配方配制方法:配制100 ml稀釋液，稱量三羥甲基氨基甲烷2.13 g、

7、檸檬酸1.24 g、D果糖0.71 g、雙蒸水80 ml、卵黃液10ml、Ham's F-1010ml和青霉素7萬(wàn)IU，混合均勻。實(shí)驗(yàn)組15只母狐用本稀釋液稀釋精液受孕，平均產(chǎn)下的小仔數(shù)為6.5±1.5只;對(duì)照組使用養(yǎng)殖場(chǎng)購(gòu)買的稀釋液，185只母狐平均產(chǎn)仔數(shù)為4.5±1.5只，差異顯著。結(jié)果表明用本精液稀釋液來(lái)稀釋精液，銀狐可以產(chǎn)出更多的后代。
　　3.建立起一種優(yōu)選的X精子分離技術(shù)，取得了一定成效，提高了雌雄比例，為提高狐貍的繁