重癥急性胰泉炎早期大鼠血清IL-6水平與腸上皮細胞Claudins蛋白表達關系的初步研究.pdf

1、目的:觀察大鼠重癥急性胰腺炎血清IL-6水平與腸上皮Claudins蛋白表達變化，初步探討Claudins蛋白與IL-6在重癥急性胰腺炎腸粘膜屏障損傷中的關系。
　　方法: SD大鼠58只，體重320～350g，隨機分成對照組(n=10)，實驗組(n=48)。實驗組分為3、12、24、48h四個時間點，每個時間點12只。所有大鼠在實驗前禁食12h，自由飲水。實驗組分兩次間隔1h腹腔內注射20％L-精氨酸溶液（2.5g/kg×2），

2、對照組大鼠同法予等量無菌生理鹽水。對照組大鼠在末次注射后于頸內靜脈取血2ml后立即處死，實驗組大鼠在末次注射后3、12、24、48h四個時間點隨機各取12只于頸內靜脈取血2ml后處死，取出胰腺組織、回腸組織，胰腺組織HE染色后觀察組織形態(tài)，回腸組織電鏡下觀察腸上皮超微結構變化，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELSIA）檢測血清IL-6水平，采用鱟試劑法(LAL)檢測血清內毒素水平，應用PCR檢測各組織細菌DNA片段，應用免疫組化測定腸上皮Clau

3、dins蛋白表達。
　　結果:對照組胰腺組織未見出血、壞死，實驗組3h與對照組無明顯變化，實驗組其他時間點可見胰腺組織不同程度的胰腺組織破壞并出血、壞死，48h時改變最顯著;對照組電鏡下腸上皮超微結構未見異常，實驗組3h時無明顯改變，實驗組其他時間點可見腸上皮斷裂并脫落，細胞間隙增寬，48h時改變最明顯。ELSIA法示對照組與實驗組血清IL-6水平分別為0.312±0.030、0.326±0.037、0.337±0.016、0.3

4、59±0.022、0.378±0.036，3、12、24、48h與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05); LAL法示對照組與實驗組血清內毒素水平分別為0.028±0.004、0.155±0.014、0.274±0.020、0.352±0.017、0.490±0.0523，各實驗組與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);實驗組各時間點各組織中細菌易位率示實驗組3h與對照組比較無明顯統(tǒng)計學差異(P=0.074，P＞0.05)，實驗組12

5、h、24h、48h與對照組比較具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);免疫組化法示對照組Claudins蛋白均勻的分布在腸上皮細胞連接的頂端;實驗組分布不均勻，Claudins蛋白表達隨時間點推移表達逐漸降低，于48h時表達最低。對照組與實驗組平均光密度值分別為0.3578±0.0021、0.3531±0.0020、0.3513±0.0018、0.3492±0.0016、0.3185±0.0023，3h時與對照組比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)