Occludin蛋白在重癥急性胰腺炎小鼠腸上皮細(xì)胞的表達(dá).pdf

1、目的：
　　 觀察小鼠重癥急性胰腺炎腸上皮occludin蛋白表達(dá)變化，初步探討occludin蛋白與腸粘膜屏障損傷的關(guān)系。
　　 方法：
　　 雄性昆明種小鼠40只，體重20-25g，隨機(jī)分為對(duì)照組（n=8）、實(shí)驗(yàn)組（n=32）。實(shí)驗(yàn)組另分為3、6、12、24h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)8只。所有小鼠在實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。實(shí)驗(yàn)組小鼠腹腔分兩次注射20％精氨酸（每次劑量250mg/100g），注射間隔為1

2、h。對(duì)照組腹腔注射等體積的無菌生理鹽水。對(duì)照組小鼠末次注射后立即處死，實(shí)驗(yàn)組小鼠在末次注射后3、6、12、24h隨機(jī)各取8只處死，取出胰腺組織、回腸組織，胰腺組織HE染色觀察組織形態(tài)，腸組織電鏡下觀察腸上皮超微結(jié)構(gòu)改變，并應(yīng)用免疫組化測(cè)定緊密連接蛋白o(hù)ccludin表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 對(duì)照組電鏡下腸上皮超微結(jié)構(gòu)未見異常；實(shí)驗(yàn)組3h無明顯變化，實(shí)驗(yàn)組其他時(shí)點(diǎn)可見腸上皮微絨毛稀疏、排列不整齊，部分?jǐn)嗔?、脫落；?xì)胞器受

3、損，核內(nèi)異染色質(zhì)濃縮且邊集，細(xì)胞連接增寬，24h時(shí)改變最明顯。免疫組化顯示對(duì)照組緊密連接蛋白o(hù)ccludin均勻一致地分布于腸上皮細(xì)胞連接處的頂端；實(shí)驗(yàn)組分布不均，occludin表達(dá)隨時(shí)間推移表達(dá)逐漸降低，24小時(shí)達(dá)最低。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組各組平均光密度值分別為0.3448±0.0028，0.3431±0.0020，0.3423±0.0019，0.3394±0.0015，0.3095±0.0027，3h時(shí)與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，6h、1