微懸臂梁生化傳感技術(shù)在醫(yī)療檢測(cè)中的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、在醫(yī)學(xué)研究中,抗原和抗體的檢測(cè)作為用于評(píng)價(jià)人和動(dòng)物免疫功能的一項(xiàng)重要指標(biāo),對(duì)疾病的診斷有重要意義。傳統(tǒng)的檢測(cè)方法需要利用同位素、熒光或者酶等標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記,可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾;而常用的ELISA只能應(yīng)用到靜態(tài)標(biāo)定方法中,耗時(shí)較長(zhǎng)。尋求無(wú)標(biāo)記、高靈敏度的新型傳感技術(shù)一直是人們研究的熱點(diǎn)。微懸臂梁生化傳感技術(shù)可以進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),無(wú)需標(biāo)記,并且容易實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高通量平行陣列測(cè)量。它的檢測(cè)原理是利用表面上了修飾探針?lè)肿拥奈冶哿喝z測(cè)樣品中

2、的靶分子,當(dāng)兩者發(fā)生具有特異性的生化反應(yīng)時(shí),產(chǎn)生的微梁表面應(yīng)力改變導(dǎo)致梁發(fā)生彎曲變形,再通過(guò)光電位置敏感探測(cè)器檢測(cè)出梁的變形值,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品中的靶分子進(jìn)行檢測(cè)。微懸臂梁傳感技術(shù)為醫(yī)學(xué)研究上抗原抗體的檢測(cè)提供了一種高效直觀的識(shí)別方法,以它為基礎(chǔ)在抗原抗體檢測(cè)研究上將具有開(kāi)拓性的意義。
   本文利用微懸臂梁生化傳感系統(tǒng)首次對(duì)對(duì)乙肝、青蒿素、馬兜鈴酸三種抗原抗體的特異性結(jié)合進(jìn)行檢測(cè),并討論抗原抗體在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的活性問(wèn)題。同時(shí)分析了溶液

3、折射率的改變對(duì)光路系統(tǒng)的影響,進(jìn)而影響系統(tǒng)的檢測(cè)靈敏度,提出一種光路系統(tǒng)的改進(jìn)方案,較好的消除了折射率對(duì)靈敏度的影響。此外,還分析了樣品的流動(dòng)速度對(duì)于微懸臂梁的干擾,并對(duì)液體的流動(dòng)速度進(jìn)行了標(biāo)定。
   采用硫醇自組裝方法將乙肝表面抗原修飾到微懸臂梁表面上,并通過(guò)酶聯(lián)檢疫法(ELISA)檢驗(yàn)了乙肝表面抗原能否成功修飾,以及在長(zhǎng)時(shí)間的修飾過(guò)程中活性是否喪失;并利用微梁生化傳感系統(tǒng)對(duì)乙肝表面抗原抗體的特異性結(jié)合進(jìn)行檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明

4、:硫醇自組裝法能夠?qū)⒁腋伪砻婵乖晒π揎椀轿冶哿航鸨砻嫔?,在長(zhǎng)達(dá)近30小時(shí)的實(shí)驗(yàn)中活性并未喪失,采用微懸臂梁生化傳感方法無(wú)法檢測(cè)到乙肝表面抗原抗體特異性結(jié)合響應(yīng)信號(hào),檢測(cè)出的響應(yīng)值經(jīng)驗(yàn)證是由溶液的折射率改變或分子物理吸附所導(dǎo)致的。
   采用巰基化二抗的修飾方法,將青蒿素抗體和馬兜鈴酸抗體修飾到微懸臂梁金表面,對(duì)不同濃度的青蒿素抗原和馬兜鈴酸抗原進(jìn)行檢測(cè),并利用ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了修飾到微懸臂梁金表面上的抗體活性。通過(guò)實(shí)驗(yàn)分析

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