馬鈴薯多倍體的誘導(dǎo)及其快速鑒定方法的建立.pdf

1、栽培種馬鈴薯主要是四倍體，其基因庫相對(duì)貧乏;野生馬鈴薯種質(zhì)資源豐富，富含優(yōu)良性狀的基因。由于野生馬鈴薯多為二倍體，與栽培種存在的倍性差異，阻礙了野生種質(zhì)資源的利用。體細(xì)胞染色體加倍的方法將二倍體誘導(dǎo)為人工四倍體，不僅可克服野生馬鈴薯與栽培種的種間雜交障礙，而且為同源多倍體研究提供了材料。
　　本文以野生二倍體馬鈴薯Solanum chacoense、自交7代純合二倍體S.chacoense523、雙單倍體DM和二倍體S.micro

2、dontum為材料，用不同濃度的秋水仙素處理馬鈴薯腋芽和進(jìn)行人工多倍體的誘導(dǎo)。取處理后的試管苗葉片的一小部分（約2 mm2）進(jìn)行細(xì)胞核制片，以5SrDNA作為探針，進(jìn)行熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)，對(duì)誘導(dǎo)后的材料進(jìn)行快速倍性鑒定，及多倍體篩選。FISH結(jié)果顯示二倍體和四倍體馬鈴薯的細(xì)胞核可分別產(chǎn)生一對(duì)和兩對(duì)雜交信號(hào)。本論文對(duì)處理的926株野生材料進(jìn)行倍性鑒定，從中篩選出3

3、株人工合成四倍體，4株同時(shí)具有二倍體和四倍體細(xì)胞的嵌合體材料，以及1株同時(shí)具有二倍體、四倍體、八倍體細(xì)胞的嵌合體。流式細(xì)胞儀分析和染色體計(jì)數(shù)分別對(duì)篩選出的多倍體和嵌合體材料進(jìn)行倍性分析，進(jìn)一步證實(shí)了篩選出的材料的真實(shí)性，同時(shí)證明了本論文中所用的篩查方法的可靠性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同濃度的秋水仙素處理馬鈴薯腋芽，進(jìn)行人工多倍體的誘導(dǎo)效果不同，其中利用0.05％濃度的秋水仙素處理10天的誘導(dǎo)效果最佳，其誘導(dǎo)率為3.3％。
　　本論文探索出