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文檔簡介
1、本試驗(yàn)以野生紫花地丁實(shí)生苗為試材,對其離體再生體系進(jìn)行研究。并以秋水仙素為誘變劑,利用種子處理法、幼苗處理法、秋水仙素加入培養(yǎng)基法和脫脂棉覆蓋莖尖法對紫花地丁染色體進(jìn)行加倍處理,確定有效的加倍方法。試驗(yàn)結(jié)果如下: 通過本試驗(yàn)研究,得到了適合紫花地丁外植體消毒、誘導(dǎo)、增殖及生根培養(yǎng)的方法和最佳培養(yǎng)基,建立了紫花地丁離體再生體系: (1)紫花地丁外植體最適宜消毒時間是70%酒精30s、0.1%HgCl<,2>溶液處理6min
2、,成活率83.3%,污染率為10%。 (2)紫花地丁外植體的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+BA3mg/L+NAA0.1mg/L,增殖系數(shù)為7.84,在此培養(yǎng)基中外植體生長健壯,生長勢強(qiáng)。 (3)紫花地丁最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+BA0.3mg/L+活性炭0.3g/L,生根率達(dá)到100%,平均每株根的數(shù)目4條左右,根健壯,根毛比較豐富。 利用秋水仙素作為誘變劑對紫花地丁多倍體的誘導(dǎo)方法進(jìn)行了研究,用秋水仙素處理時,不同處
3、理濃度、不同處理時間對紫花地丁外植體的處理效果不同: (1)種子處理法濃度0.4%處理24小時和濃度0.8%處理16小時誘變率均比較高,分別為43.3%和46.7%。 (2)幼苗處理法處理濃度為0.2%,處理時間為16小時和處理濃度為0.4%,處理時間為8小時時得到最高誘變率為80%。 (3)秋水仙素加入培養(yǎng)基法秋水仙素濃度為0.002%處理14d達(dá)到最好效果。誘變率為63.3%。另外0.005%處理7d結(jié)果也很
4、好,誘變率為56.7%。兩個處理的死亡率均較低,分別為23.3%和16.7%。 (4)脫脂棉覆蓋莖尖法0.02%濃度處理6d效果最好,誘變率最高,達(dá)到73.3%,死亡率相對較低,為13.3%。 最終對誘導(dǎo)產(chǎn)生的多倍體穩(wěn)定性進(jìn)行測定,結(jié)果表明:種子處理法、幼苗處理法處理方法簡單,易于操作,但穩(wěn)定性差。組織培養(yǎng)法與秋水仙素藥劑處理相結(jié)合可顯著提高加倍成功率。其中秋水仙素加入培養(yǎng)基法易得到穩(wěn)定的多倍體植株。多倍植株形態(tài)上表現(xiàn)為
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