紫花地丁多倍體誘導(dǎo)方法的研究.pdf

1、本試驗(yàn)以野生紫花地丁實(shí)生苗為試材，對其離體再生體系進(jìn)行研究。并以秋水仙素為誘變劑，利用種子處理法、幼苗處理法、秋水仙素加入培養(yǎng)基法和脫脂棉覆蓋莖尖法對紫花地丁染色體進(jìn)行加倍處理，確定有效的加倍方法。試驗(yàn)結(jié)果如下： 通過本試驗(yàn)研究，得到了適合紫花地丁外植體消毒、誘導(dǎo)、增殖及生根培養(yǎng)的方法和最佳培養(yǎng)基，建立了紫花地丁離體再生體系： (1)紫花地丁外植體最適宜消毒時間是70％酒精30s、0.1％HgCl<,2>溶液處理6min

2、，成活率83.3％，污染率為10％。 (2)紫花地丁外植體的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+BA3mg/L+NAA0.1mg/L，增殖系數(shù)為7.84，在此培養(yǎng)基中外植體生長健壯，生長勢強(qiáng)。 (3)紫花地丁最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+BA0.3mg/L+活性炭0.3g/L，生根率達(dá)到100％，平均每株根的數(shù)目4條左右，根健壯，根毛比較豐富。 利用秋水仙素作為誘變劑對紫花地丁多倍體的誘導(dǎo)方法進(jìn)行了研究，用秋水仙素處理時，不同處

3、理濃度、不同處理時間對紫花地丁外植體的處理效果不同： (1)種子處理法濃度0.4％處理24小時和濃度0.8％處理16小時誘變率均比較高，分別為43.3％和46.7％。 (2)幼苗處理法處理濃度為0.2％，處理時間為16小時和處理濃度為0.4％，處理時間為8小時時得到最高誘變率為80％。 (3)秋水仙素加入培養(yǎng)基法秋水仙素濃度為0.002％處理14d達(dá)到最好效果。誘變率為63.3％。另外0.005％處理7d結(jié)果也很

4、好，誘變率為56.7％。兩個處理的死亡率均較低，分別為23.3％和16.7％。 (4)脫脂棉覆蓋莖尖法0.02％濃度處理6d效果最好，誘變率最高，達(dá)到73.3％，死亡率相對較低，為13.3％。 最終對誘導(dǎo)產(chǎn)生的多倍體穩(wěn)定性進(jìn)行測定，結(jié)果表明：種子處理法、幼苗處理法處理方法簡單，易于操作，但穩(wěn)定性差。組織培養(yǎng)法與秋水仙素藥劑處理相結(jié)合可顯著提高加倍成功率。其中秋水仙素加入培養(yǎng)基法易得到穩(wěn)定的多倍體植株。多倍植株形態(tài)上表現(xiàn)為