量子點(diǎn)免疫層析試紙條同步定量檢測(cè)血液傳染病三種指標(biāo)的研究.pdf

1、乙型肝炎、丙型肝炎和艾滋病是三種常見(jiàn)的血液傳染病,嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康,在臨床輸血和獻(xiàn)血過(guò)程中,國(guó)家衛(wèi)生部規(guī)定醫(yī)療和衛(wèi)生機(jī)構(gòu)必須對(duì)這三種傳染病進(jìn)行強(qiáng)制性檢測(cè)。目前,針對(duì)這三種血液傳染病的臨床診斷方法有很多,但各有缺點(diǎn):如檢測(cè)靈敏度較低,且不能同步定量檢測(cè);需要特殊檢測(cè)儀器,且檢測(cè)耗時(shí)較長(zhǎng)等。針對(duì)這些檢測(cè)方法的不足之處,本研究將量子點(diǎn)(Quantum dot)技術(shù)和免疫層析技術(shù)相結(jié)合,研制一種量子點(diǎn)免疫層析試紙條,從而實(shí)現(xiàn)乙型肝炎、丙型肝炎

2、和艾滋病的同步定量檢測(cè)。
　　本文以EDC/NHS為反應(yīng)活化劑,分別制備530nm CdSe/ZnS QD-抗HBsAg單抗、576nm CdSe/ZnS QD-HCV Ag和620nm CdSe/ZnS QD-HIV Ag偶聯(lián)物,并將三種量子點(diǎn)偶聯(lián)物噴涂于結(jié)合墊上,把抗HBsAg多抗、HCV Ag和HIV Ag包被于NC膜上作為檢測(cè)線(xiàn),質(zhì)控線(xiàn)包被羊抗鼠IgG,然后將樣品墊、結(jié)合墊、NC膜、吸水墊按順序組裝在PVC底板上,制備成量

3、子點(diǎn)免疫層析試紙條。通過(guò)熒光閱讀儀閱讀量子點(diǎn)試紙條的檢測(cè)帶和質(zhì)控帶的熒光值,根據(jù)不同濃度的HBsAg、HCV抗體和HIV抗體的檢測(cè)帶(T)和質(zhì)控帶(C)熒光值的不同,可以得出T/C的比值,此比值對(duì)應(yīng)HBsAg、HCV抗體和HIV抗體濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),即可實(shí)現(xiàn)乙型肝炎、丙型肝炎和艾滋病的同步定量檢測(cè)。
　　本課題研究結(jié)果:
　　(1)量子點(diǎn)免疫層析試紙條和膠體金試紙條以及ELISA法同時(shí)檢測(cè)臨床標(biāo)本58份,其中HBsAg陽(yáng)性38

4、份,陰性20份,用量子點(diǎn)試紙條和膠體金試紙條以及ELISA法分別檢測(cè),比較結(jié)果顯示:量子點(diǎn)試紙條的符合率為98.1％,靈敏度為100％,特異性為95％,檢測(cè)下限濃度為2.6ng∕ml,檢測(cè)用時(shí)為10分鐘。相對(duì)ELISA法,大大節(jié)省了檢測(cè)時(shí)間,與金標(biāo)法相比,靈敏度得到提高。
　　(2)量子點(diǎn)試紙條同步檢測(cè)HBsAg和HIVAb時(shí),HBsAg陰性符合率為94.2％,HIVAb陰性符合率為89.6％;HBsAg陽(yáng)性符合率為87.2％,H

5、IVAb陽(yáng)性符合率為83.7％;HBsAg檢測(cè)靈敏度為95％,HIVAb檢測(cè)的靈敏度為90.1％;同步檢測(cè)HBsAg和HIVAb時(shí),HBsAg和HIVAb的變異系數(shù)分別為12％和14.5％,均小于15％。
　　(3)量子點(diǎn)免疫層析試紙條同步定量檢測(cè)HBsAg、HCV Ab和HIV Ab探索實(shí)驗(yàn)顯示:同步檢測(cè)HBsAg、HCV Ab和HIV Ab時(shí),對(duì)這三種指標(biāo)的定量檢測(cè)下限濃度分別為2.6 ng∕ml、15 ng∕ml和10 ng