四種檢疫性植物病毒的膠體金免疫層析試紙條的研究.pdf

1、膠體金免疫層析技術(shù)目前技術(shù)比較的成熟，也有許多關(guān)于膠體金靈敏度的報道。將它與ELISA方法的靈敏度進(jìn)行比對后的得出結(jié)論，膠體金免疫層析試紙條的靈敏度與ELIsA基本相近，許多實(shí)驗(yàn)的靈敏度都可達(dá)到1ng/ml或更低水平。
　　 膠體金免疫層析試紙條最大的優(yōu)點(diǎn)在于無需借助實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備和專業(yè)技術(shù)人員，只需要取少量的植物汁液滴在試紙條上的樣品墊上，便可以在十五分鐘內(nèi)得到檢測結(jié)果，它適合對一些檢疫性植物病毒當(dāng)場、即時地進(jìn)行檢測。
　

2、　 菜豆莢斑駁病毒、南方菜豆花葉病毒、煙草環(huán)斑病毒和番茄環(huán)斑病毒是我國重要的進(jìn)境檢疫性有害生物。就檢疫的南方菜豆花葉病毒和菜豆莢斑駁病毒而言，運(yùn)用ELISA或者是RT-PCR檢測這兩種病毒時，由于種皮，胚，或胚乳中病毒的含量較低或者含有某些ELISA，RT-PCR反應(yīng)抑制物，因而檢測的難度較大運(yùn)用，而運(yùn)用膠體金免疫層析技術(shù)在一定程度上可以彌補(bǔ)上兩種方法的不足[14]。
　　 為解決RT-PCR方法很難直接檢測大豆病種子中含有病

3、毒的問題，將簡便快捷的膠體金免疫層析技術(shù)（GICA）和高靈敏度的普通RT-PCR方法相結(jié)合，建立了膠體金免疫層析試紙條和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（GICA-RT-PCR）檢測方法，即先用GICA捕獲病毒，將捕獲的病毒直接進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，簡化了檢測的步驟，提高了檢測的靈敏度。本實(shí)驗(yàn)將所研究的四種植物病毒制備了膠體金免疫層析試紙條，并用試紙條分別對病葉，感病的種皮一一經(jīng)行了檢測。
　　 結(jié)果表明：用該方法比單用GICA檢測大豆種皮