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1、 目的:研究嬰幼兒血管瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞中血管生成素受體Tie2的表達(dá)情況和Tie2基因甲基化情況,初步探討血管生成素受體Tie2及其甲基化在嬰幼兒血管瘤生長(zhǎng)過(guò)程中的作用和意義。方法:以60例血管瘤患兒手術(shù)切除的血管瘤組織為研究對(duì)象,其中增生期和消退期標(biāo)本各30例,另取正常皮膚組織(包莖患兒包皮環(huán)切術(shù)切除的包皮組織)30例作為正常對(duì)照。應(yīng)用甲基化特異性PCR(MSP)檢測(cè)Tie2基因甲基化情況;應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR、Western blot
2、技術(shù)檢測(cè)血管生成素受體Tie2 mRNA和蛋白表達(dá)情況;應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR和明膠酶譜技術(shù)檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA表達(dá)和蛋白活性變化情況。結(jié)果:①M(fèi)SP 結(jié)果顯示:30例正常包皮組織中,Tie2基因非甲基化PCR擴(kuò)增陽(yáng)性,未見(jiàn)甲基化PCR擴(kuò)增;30例增殖期血管瘤組織中,Tie2基因甲基化PCR擴(kuò)增陽(yáng)性21例(70%),其中完全甲基化14例,部分甲基化7例。在消退期血管瘤中,Tie2甲基化為24例(80%),其中,完全
3、甲基化21例,部分甲基化3例。②Real-time PCR和Westem blot結(jié)果顯示:在增生期和消退期瘤體中,Tie2 mRNA和蛋白的的表達(dá)量明顯高于正常包皮組織(P<0.05);?Real-time PCR和明膠酶譜結(jié)果顯示:與正常包皮組織相比,增生期瘤體和消退期瘤體中MMP-9 mRNA表達(dá)升高(P<0.05),并且明膠酶的活性也升高(P<0.05)。結(jié)論:嬰幼兒血管瘤中存在Tie2的高表達(dá),并且Tie2基因存在甲基化變異情
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