血管生成素及其受體在腹膜透析腹膜組織中的表達.pdf

1、目的:眾所周知,長期的腹膜透析會導致腹膜功能逐漸出現(xiàn)衰退,最終導致超濾衰竭,使得尿毒癥患者最終不得已退出腹膜透析。新近研究發(fā)現(xiàn),腹膜發(fā)生血管新生是患者腹膜功能衰退的主要原因之一。本實驗旨在通過建立尿毒癥腹膜透析大鼠模型,了解其腹膜組織血管生成素及其受體的表達情況以及引起血管生成素及其受體變化的影響因素,以探討腹膜新生血管的發(fā)生機制。
　　 方法:選取健康SD雄性大鼠30只,體重約為180-220g,均購于江西省中醫(yī)院醫(yī)學動物實驗

2、中心。適應性喂養(yǎng)一周以后,隨機選取其中22只大鼠建立經(jīng)典的5/6腎切除術尿毒癥模型,造模四周后采集大鼠尾靜脈測血肌酐、尿素氮值,腎切除術后4周,造模成功的大鼠腹腔內(nèi)予植入自制的腹透管,隨機分為尿毒癥組(NS組)及腹透組(PD組)。尿毒癥組每日給予20ml生理鹽水腹腔灌注,腹透組則每日給予20ml4.25％百特腹透液腹腔灌注,共持續(xù)六周。余下未造模的8只大鼠擬為對照組(C組),行假手術且不予任何液體灌注。所有的大鼠均正常飲食飲水,灌液六周

3、后取大鼠腹膜組織,觀察腹膜血管新生情況；免疫組織化學染色及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應技術(reverse transcription-polymerise chainreaction,RT-PCR)檢測腹膜組織血管生成素及其受體的表達變化。
　　 結果:(1)實驗表明PD組相對其他兩組新生血管數(shù)顯著增多,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；NS組新生血管數(shù)較C組為多,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)免疫組化顯示各組大鼠血管生

4、成素1(Angpt-1)陽性細胞數(shù)比較P>0.05,無統(tǒng)計學意義；血管生成素2(Angpt-2)及其受體2(Tie-2)陽性細胞數(shù)PD組相對于C組和NS組顯著增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；NS組較C組亦有增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(3)RT-PCR顯示Angpt-1mRNA條帶半定量分析結果在三組間無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；PD組Angpt-2 mRNA和Tie-2mRNA條帶深于其他兩組,半定量分析差異

5、具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；NS組Angpt-2 mRNA和Tie-2 mRNA半定量分析結果高于C組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(4)Angpt-2陽性細胞數(shù)與腹膜新生血管數(shù)之間存在直線正相關關系(P<0.05,R<0.855)；Angpt-2 mRNA半定量分析結果與腹膜新生血管數(shù)之間辦呈直線正相關關系(P<0.05,R<0.742)。
　　 結論:尿毒癥狀態(tài)及腹膜透析液均會上調(diào)腹膜血管生成素-2及其受體的表達