心血瘀阻證心肌血管新生及其養(yǎng)心通脈有效部位方干預(yù)效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：研究中醫(yī)絡(luò)病學(xué)及血管新生的相關(guān)性，從絡(luò)病學(xué)理論角度闡述心血瘀阻證的病理基礎(chǔ)。
　　 方法：運(yùn)用文獻(xiàn)研究，主要參考CNKI 數(shù)據(jù)庫、VIP 數(shù)據(jù)庫中收錄的與絡(luò)病理論相關(guān)文獻(xiàn)、血管新生相關(guān)文獻(xiàn)。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過研究表明中醫(yī)的絡(luò)病理論在運(yùn)用于冠心病時(shí)與血管新生具有相關(guān)性，主要體現(xiàn)在絡(luò)脈系統(tǒng)與現(xiàn)代的血管神經(jīng)、神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)、血管內(nèi)皮損傷具有推論上的相關(guān)性。
　　 2.心血瘀阻證的絡(luò)病學(xué)

2、基礎(chǔ)為主要表現(xiàn)為心絡(luò)瘀阻、心絡(luò)絀急和絡(luò)虛不榮三個(gè)方面。
　　 第二部分:抗心血瘀阻證的有效成分部位方的研究實(shí)驗(yàn)1：養(yǎng)心通脈方起主要作用有效成分部位抗心肌缺血的研究
　　 目的：尋找養(yǎng)心通脈方中起主要作用的有效部位。
　　 方法：取wistat 雄性大鼠120 只，隨機(jī)分為12 組，每組10 只，包括人參皂苷組、人參多糖組、丹參酮ⅡA 組、丹參菲醌組、復(fù)方苷元組、復(fù)方苷類、復(fù)方蛋白組、總多糖組、總生物堿組、總揮發(fā)油

3、組、空白模型組和健康對(duì)照組。其中10 個(gè)有效部位組均在喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料同時(shí)，灌服相應(yīng)的有效部位口服液，每次4 毫升；健康對(duì)照組給于灌服等量的生理鹽水。每天1 次，連續(xù)10天，于第11 天開始試驗(yàn)。每例大鼠在麻醉后均作Ⅱ?qū)?lián)心電圖1 次，隨后按上述方法造模，記錄觀察注射垂體后葉素后15s、30s、120s、300s、600s 的心電圖；頸動(dòng)脈插管取血做血液流變學(xué)指標(biāo)。
　　 結(jié)論：養(yǎng)心通脈方中提取分離出10 種有效部位群，其中人參皂苷

4、、丹參酮ⅡA、總生物堿、人參多糖、總揮發(fā)油，5 種成分具有顯著的抗心肌缺血作用，故作為養(yǎng)心通脈方起主要作用的有效成分部位，而將復(fù)方多糖與丹參菲醌作為次要有效成分部位。復(fù)方苷類、復(fù)方苷元、復(fù)方蛋白3 種成分部位因其沒有抗心肌缺血（心血瘀阻證）的作用，且對(duì)血流變學(xué)也無改善作用，故將其列為養(yǎng)心通脈方無效成分剔出。
　　 實(shí)驗(yàn)2：養(yǎng)心通脈方主要與次要有效成分部位交互作用抗心肌缺血研究目的：明確5 個(gè)主要成分部位與2 個(gè)次要成分之間是否有

5、交互作用方法：按L4（23）正交設(shè)計(jì)安排實(shí)驗(yàn)，將人參皂苷、丹參酮ⅡA、總生物堿、人參多糖、總揮發(fā)油做為基礎(chǔ)因子，復(fù)方多糖與丹參菲醌作為考察因子。
　　 將wistar 雄性大鼠40 只，隨機(jī)分為5 組，每組8 只，包括處方1 組、處方2組、處方3、處方4 組，模型組。各組均在喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料同時(shí)，灌服相應(yīng)的有效部位口服液，每次4 毫升；每天1 次，連續(xù)10 天，于第11 天開始試驗(yàn)。
　　 每列大鼠在麻醉后均作Ⅱ?qū)?lián)心電圖1

6、 次，隨后按上述方法造模，記錄觀察注射垂體后葉素后15s、30s、120s、300s、600s 的心電圖；頸動(dòng)脈插管取血做血液流變學(xué)指標(biāo)。
　　 結(jié)論：養(yǎng)心通脈方主要與次要有效成分部位無交互作用。
　　 實(shí)驗(yàn)3：養(yǎng)心通脈方各有效成分部位的有效劑量配伍抗心血瘀阻證研究目的：探討?zhàn)B心通脈方有效部位配伍的最佳劑量方法：取wistar 雄性大鼠72 只，隨機(jī)分為9 組，每組8 只，按L9（34）正交表設(shè)計(jì)安排試驗(yàn)，每個(gè)因子取3

7、個(gè)水平。9 組均在喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料同時(shí)，灌服相應(yīng)的有效部位口服液，每次4 毫升；每天1 次，連續(xù)10 天，于第11 天開始試驗(yàn)。每例大鼠在麻醉后均作Ⅱ?qū)?lián)心電圖1 次，隨后按上述方法造模，記錄觀察注射垂體后葉素后15s、30s、120s、300s、600s 的心電圖。
　　 結(jié)果及結(jié)論：采用直觀分析法分析結(jié)果，5 種有效部位的最佳配伍為：人參皂苷34.33g 生藥／kgw，丹參酮ⅡA 1.27g 生藥/kgw、人參多糖4.77g 生

8、藥/kgw、總生物堿取0.67g 生藥/kgw、總揮發(fā)油62.2ml 生藥/kgw。
　　 第三部分:養(yǎng)心通脈有效部位方促心血瘀阻證心肌血管新生的研究
　　 實(shí)驗(yàn)1：養(yǎng)心通脈有效部位方對(duì)心血瘀阻證大鼠血管生長(zhǎng)因子VEGF 及bFGF 影響的研究目的：探討?zhàn)B心通脈有效部位方治療心血瘀阻證的機(jī)理方法：將結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支復(fù)制心血瘀阻證大鼠模型成功后的24 只大鼠隨機(jī)分為模型組、YTⅠ治療組、YTⅡ治療組，SXBXW 治

9、療組，再與6只假手術(shù)組、6 只正常組，一共組成6 組；各組均在喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料同時(shí)，灌服相應(yīng)處方口服液，每次4 毫升，健康對(duì)照組、模型組灌服等量的生理鹽水。
　　 每天1 次，連續(xù)2 周，于第15 天，處死動(dòng)物取材。用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)CD34、VEGF、bFGF 表達(dá)。
　　 結(jié)論：促進(jìn)VEGFmRNA、bFGFmRNA 上調(diào),使VEGF、bFGF 的合成分泌增加，引起缺血區(qū)血管新生，從而側(cè)支循環(huán)的良好建立可能是養(yǎng)心通脈有

10、效成分部位方治療心血瘀阻證的重要機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)2：養(yǎng)心通脈有效部位方對(duì)心血瘀阻證大鼠血管生長(zhǎng)因子基因表達(dá)量影響的研究目的：探討?zhàn)B心通脈有效部位方治療心血瘀阻證的機(jī)理方法：將結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支復(fù)制心血瘀阻證大鼠模型成功后的24 只大鼠隨機(jī)分為模型組、YTⅠ治療組、YTⅡ治療組，SXBXW 治療組，再與6只假手術(shù)組、6 只正常組，一共組成6 組；各組均在喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料同時(shí)，灌服相應(yīng)處方口服液，每次4 毫升，健康對(duì)照組、模型組

11、灌服等量的生理鹽水。
　　 每天1 次，連續(xù)2 周，于第15 天，處死動(dòng)物取材。用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)CD34、VEGF、bFGF 表達(dá)；
　　 結(jié)論：促進(jìn)VEGFmRNA、bFGFmRNA 上調(diào)，促進(jìn)VEGF、bFGF 的合成分泌增加，引起缺血區(qū)血管新生，從而側(cè)支循環(huán)的良好建立可能是養(yǎng)心通脈有效成分部位方治療心血瘀阻證的重要機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)3 ：養(yǎng)心通脈有效部位方對(duì)心血瘀阻證大鼠冠狀微循環(huán)及相關(guān)因子影響的研究目

12、的：探討?zhàn)B心通脈有效部位方治療心血瘀阻證的機(jī)理方法：取上述wistar 雄性大鼠128 只，隨機(jī)分為4 組：養(yǎng)心通脈有效部位方組（養(yǎng)通Ⅱ組）、復(fù)方丹參注射液組（丹參組）、空白模型組（模型組）、假手術(shù)組。結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支復(fù)制心血瘀阻證大鼠模型10 分鐘后經(jīng)頸外靜脈注入給藥，養(yǎng)心通脈有效部位方組按0.5ml/100g 體重給予YTⅡ注射液、復(fù)方丹參注射液組按0.5ml/100g 體重給予復(fù)方丹參注射液，空白模型組按0.5ml/100

13、g 體重給予生理鹽水，假手術(shù)組按0.5ml/100g 體重給予生理鹽水。用藥15 分鐘后，采用墨汁灌注法進(jìn)行冠狀微循環(huán)形態(tài)觀察，采用熒光造影法進(jìn)行冠狀微循環(huán)活體觀察，采頸動(dòng)脈血用生化檢測(cè)法，按不同試劑盒操作要求分別檢測(cè)心肌組織丙二醛（MDA）含量、心肌及血清酶學(xué)指標(biāo)、血管內(nèi)皮功能指標(biāo)。
　　 結(jié)論：養(yǎng)心通脈有效部位方注射液促進(jìn)心血瘀阻部位的血管新生，改善冠狀微循環(huán)與抗氧自由基生成、減輕鈣超載和調(diào)整血管內(nèi)皮細(xì)胞功能等多種機(jī)制有關(guān)。