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文檔簡介
1、目的:觀察補中法、升陽法、補中升陽法對脾氣虛模型的補氣健脾作用,研究風藥與補氣健脾藥配伍的增效作用。 方法:50只健康Wistar大鼠,雄性,8-12周齡,體重220±20g,均符合Ⅰ級動物標準。將50只大鼠隨機分為5組,每組10只。分組情況為1)正常對照組:生理鹽水2ml灌服,每日1次,連續(xù)20天;2)脾氣虛證模型組:選用利血平造模法,本實驗根據(jù)臨床脾氣虛病人常見交感神經(jīng)功能低下,副交感神經(jīng)功能偏亢,利用利血平耗竭兒茶酚胺的作
2、用模擬脾氣虛證的表現(xiàn)。近年來研究表明:利血平所致的“脾虛”動物模型不僅在消化方面出現(xiàn)明顯的機械障礙,如:泄瀉、食欲減退、胃腸蠕動亢進等,并同時伴有其他植物神經(jīng)功能紊亂的表現(xiàn),如:體溫下降,畏寒乏力,瞇眼等。模型的重現(xiàn)性好,簡單易行。在動物適應性飼養(yǎng)一周后,使用利血平注射液,生理鹽水稀釋成0.5mg/ml,0.15mg/kg/d(0.1ml/只/d),1次/d,腹側(cè)皮下注射,連續(xù)造模13天。3)治療組:分為補中組、升陽組、補中升陽組,各組
3、造模方法同前,補中組選用補中方,由黨參、懷山藥、白術(shù)、茯苓、炙甘草組成,比例為10:10:5:5:3;升陽組選用升陽方,由葛根、防風、白芷、蘇梗組成,比例為10:5:5:3;補中升陽組由補中方和升陽方組成,包括黨參、懷山、白術(shù)、茯苓、炙甘草、葛根、防風、白芷,比例為10:10:5:5:3:5:2.5:2.5。各組均用水煎成相應濃度,4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。均于造模完成?第14天)開始灌胃給藥,2ml/d,1次/d,連續(xù)7天。于末次給藥后禁
4、食12h,排盡尿液,稱重后每只動物予3%D-木糖溶液2ml/100g灌胃處理,1小時后心臟取血入離心管,離心機(3500rmin-1)離心制備血清,參照南京建成生物工程研究所血清D-木糖吸收率的測定方法。設置空白管(B)加0.03ml蒸餾水,標準管(S)加標準應用液0.03ml,測定管(T)加待測血清0.03ml,對照管加正常血清0.03ml,各管加顯色劑3ml,混勻后,各管同時放入100℃水中煮沸4分鐘,取出立即放入冰水中冷卻,再混勻
5、,用721分光光度計于波長554nm處水調(diào)零比色,測定各管吸光度OD值,按公式可計算出血清D-木糖吸收值。血紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血漿總蛋白及白蛋白含量測定:由瀘州醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院檢驗科檢測。觀察正常對照組,脾氣虛模型組,補中組,升陽組,以及補中升陽組模型的一般情況,測定其血清D-木糖吸收率、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血清總蛋白、血清白蛋白的量,并觀察其含量變化。所有數(shù)據(jù)用X±S表示。實驗結(jié)果采用SPSS11.0版本處理,多組間均數(shù)比較采
6、用單因素方差分析,組間均數(shù)兩兩比較采用ANOVA中的LSD多重比較方法。 結(jié)果:在注射利血平后,動物表現(xiàn)出外觀差,蜷縮,閉眼,毛色晦暗無光澤,乏力、倦怠嗜睡、反應遲鈍、活動減少、四肢無力、甚或行走歪斜,腹瀉,體重下降(P<0.01)等脾氣虛癥狀,表明采用利血平造成脾氣虛模型是成功的。與脾氣虛模型組比較,經(jīng)補中方、補中升陽方治療后一般情況有所改善,精神好轉(zhuǎn),活動和攝食、飲水量增加;體重升高,與造模組相比有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.0
7、1),且以補中升陽組體重升高最為顯著(P<0.01)。升陽組改變不太明顯。各組大鼠血清D-木糖吸收率檢測值的變化:模型組與正常組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。而補中組、補中升陽組能使指標有明顯改善,與造模組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),且補中升陽組的作用優(yōu)于單純的補中組(P<0.05),升陽組指標則無明顯改變。紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、血漿總蛋白、血漿白蛋白含量均有不同程度的上升;模型組的含量低于正常組(P<0.05),
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