大鼠視神經(jīng)不全損傷動(dòng)物模型的建立及重組人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)視神經(jīng)不全損傷后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:建立實(shí)驗(yàn)性大鼠視神經(jīng)不同程度不全損傷模型,在此基礎(chǔ)上觀察重組人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)視神經(jīng)不全損傷后視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用.方法:用同一把大號(hào)無(wú)創(chuàng)血管夾在球后1.5mm處分別鉗夾成年大鼠視神經(jīng)5秒、10秒、20秒、40秒,7天后取材觀察不同致傷量對(duì)視神經(jīng)病理、超微結(jié)構(gòu)的影響;鉗夾前及鉗夾后即時(shí)、3天、7天、14天、28天時(shí)觀察F-VEP變化情況,并以軸突占視神經(jīng)橫截面積的比例和F-VEP恢復(fù)程度作為劃分損傷程度的標(biāo)準(zhǔn).以大鼠視神經(jīng)中度

2、損傷為模型,實(shí)驗(yàn)組傷后即時(shí)、7天、14天、28天時(shí)玻璃體腔內(nèi)注射rhCNTF溶液2μl(1μl/μl),對(duì)照組注射等量蒸餾水(rhCNTF溶劑).傷后7天、14天、28天、56天取材檢測(cè).1.取材前48小時(shí)每組部分大鼠用粒藍(lán)逆行標(biāo)記RGCs,48小時(shí)后取視網(wǎng)膜熒光顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)RGCs密度.2.用RT-PCR方法檢測(cè)、觀察rhCNTF對(duì)視網(wǎng)膜組織表達(dá)GAP-43mRNA影響.3.用免疫組化方法檢測(cè)、觀察rhCNTF對(duì)視網(wǎng)膜組織GAP