新鮮羊膜對周圍神經(jīng)損傷修復(fù)影響的實驗研究.pdf

1、目的:周圍神經(jīng)損傷是臨床上較常見的致殘性疾病，直接損害了勞動力資源，給社會和家庭生活造成沉重的負(fù)擔(dān)。周圍神經(jīng)損傷修復(fù)后再生受多種因素的影響，吻合口處的微環(huán)境及局部的癜痕形成嚴(yán)重影響了神經(jīng)損傷后修復(fù)效果，為此，改善局部微環(huán)境及減少局部瘢痕有利于周圍神經(jīng)再生促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。羊膜具有半透性，保證營養(yǎng)物質(zhì)順利透過，促進(jìn)雪旺細(xì)胞增殖，加速神經(jīng)軸索生長，抑制周圍成纖維細(xì)胞的生物活性，限制神經(jīng)周圍組織侵入神經(jīng)斷端，抑制周圍瘢痕形成，防止神經(jīng)粘連及神

2、經(jīng)壓迫等。本實驗構(gòu)建大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型，在顯微鏡下行神經(jīng)吻接術(shù)，吻接處給予人新鮮羊膜包裹，通過大體觀察、光鏡觀察、透射電鏡、免疫組化、神經(jīng)電生理檢測、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)等指標(biāo)分析，評價新鮮羊膜促進(jìn)周圍神經(jīng)損傷后修復(fù)再生的效果。
　　方法:選用成年、健康SD大鼠60只，雌雄不限，體重220克～250克。取一側(cè)腿制備坐骨神經(jīng)急性損傷模型。隨機(jī)分A組（修復(fù)神經(jīng)后用人新鮮羊膜包裹吻合口），B組（修復(fù)神經(jīng)后用生物膜包裹吻合口），C組（修復(fù)神

3、經(jīng)后不做任何處理）三組，每組20只。術(shù)后2、4、8和12周各行大體觀察、光鏡觀察、免疫組織化學(xué)檢測（s-100蛋白在神經(jīng)組織中的表達(dá)情況）;分別于術(shù)后4、8、12周各行透射電鏡觀察、軸突成像分析（計數(shù)有髓神經(jīng)纖維數(shù)目、軸突直徑及髓鞘厚度）、復(fù)合肌肉動作電位檢測（測量并記錄潛伏期、波幅和神經(jīng)傳導(dǎo)速度）、計算坐骨神經(jīng)功能指數(shù)及其恢復(fù)率。所有數(shù)據(jù)均進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　結(jié)果:大體觀察:三組大鼠術(shù)后手術(shù)切口都未出現(xiàn)感染，7天后切口拆線，切

4、口一期愈合;三組大鼠術(shù)后2周大部出現(xiàn)下肢稍腫脹，活動明顯減少且跛行。2周后腫脹、精神狀態(tài)及飲食逐漸恢復(fù)，A、B組大鼠跛行時間較C組短，活動量恢復(fù)更早。A、B組和C組相比足底和足趾皮膚潰瘍大鼠數(shù)量少且潰瘍恢復(fù)時間短。術(shù)后2周羊膜、生物膜局部稍有吸收，4周大部吸收，8周完全吸收。A組、B組神經(jīng)和周圍組織稍有粘連且粘連較疏松，活動度可。C組神經(jīng)和周圍組織廣泛緊密粘連，鈍性不易分離，活動度差。光鏡觀察:術(shù)后2、4、8、12周A組、B組神經(jīng)恢復(fù)情

5、況明顯優(yōu)于C組。電鏡觀察:術(shù)后4周A、B、C三組神經(jīng)纖維再生均不明顯，板層結(jié)構(gòu)均不清晰。術(shù)后8周、12周A、B組比C組神經(jīng)纖維再生數(shù)量更多、髓鞘厚度厚、板層結(jié)構(gòu)更清晰，軸突直徑更大。免疫組織化學(xué)檢測:A、B組中S-100蛋白表達(dá)及分布均優(yōu)于同時期C組。軸突圖像分析:A、B組神經(jīng)吻合口遠(yuǎn)端有髓神經(jīng)纖維直徑、髓鞘厚度及橫截面有髓神經(jīng)纖維數(shù)目均優(yōu)于同時期C組，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。神經(jīng)電生理檢測:術(shù)后術(shù)側(cè)神經(jīng)的誘發(fā)電位潛伏期、波幅