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文檔簡介
1、本文主要從以下幾個部分展開論述:
第一部分 端側(cè)吻合修復大鼠周圍神經(jīng)損傷的實驗研究
目的:探討不同方式的端側(cè)吻合修復周圍神經(jīng)損傷對供體、受體神經(jīng)再生和肌肉萎縮保護的影響。
方法:60只Lewis大鼠腓神經(jīng)切斷后,按照不同顯微外科修復方式隨機分為3組:A組(20只),腓神經(jīng)遠近斷端行原位神經(jīng)外膜縫合;B組(20只),脛神經(jīng)外膜開窗,與腓神經(jīng)遠斷端行端側(cè)神經(jīng)外膜吻合;C組(20只),脛神經(jīng)40%切斷,與腓神經(jīng)遠
2、斷端行端側(cè)神經(jīng)外膜吻合。術后6周、12周、18周和24周,每組各取5只大鼠,神經(jīng)電生理檢測脛神經(jīng)、腓神經(jīng)的潛伏期和振幅恢復率,檢測腓腸肌和脛前肌最大強直肌張力恢復率,大鼠處死后測量腓腸肌和脛前肌肌重維持率,肌肉石蠟切片HE染色測量最大肌纖維橫截面積恢復率,脛神經(jīng)和腓神經(jīng)半薄切片后行甲苯胺藍染色觀察神經(jīng)纖維再生,檢測有髓神經(jīng)纖維恢復率。
結果:1.供體神經(jīng)肌肉系統(tǒng):
各時間點,B組大鼠脛神經(jīng)電生理、有髓纖維組織形態(tài)學以
3、及腓腸肌肌濕重、肌纖維橫截面積和肌力與A組無顯著差異;C組大鼠脛神經(jīng)神經(jīng)電生理(ARR和LDR)術后6周均明顯受累,ARR均較其余兩組明顯減低,LDR較A組和B組明顯延長,12周后各組ARR和LDR無差異;C組大鼠脛神經(jīng)有髓纖維恢復率在術后6周和12周明顯低于B組,術后18周和24周時與B組無明顯差異;C組大鼠腓腸肌肌重、肌力和肌纖維面積在研究早期(6周-18周)不同程度受損,術后24周均獲得有效恢復。
2.受體神經(jīng)肌肉系統(tǒng):
4、
術后18和24周,B組大鼠腓神經(jīng)潛伏期較A組和C組明顯延長。各時間點C組大鼠腓神經(jīng)有髓纖維數(shù)目、脛前肌最大強直肌力恢復率和肌纖維橫截面積恢復率均較B組明顯增高,與A組無明顯差別。術后6周,各組脛前肌肌重維持率無顯著差異,12周后A組和C組脛前肌肌重維持率均顯著高于B組。
結論:伴有供體神經(jīng)外膜開窗或部分切斷的端側(cè)吻合均可獲得受體神經(jīng)纖維再生和受體肌肉肌重、肌力的恢復。外膜開窗對供體神經(jīng)肌肉系統(tǒng)不會產(chǎn)生顯著的影響和損
5、害。部分供體神經(jīng)切斷的端側(cè)吻合可以獲得更有效的神經(jīng)肌肉系統(tǒng)恢復,但術后早期難以避免發(fā)生供體系統(tǒng)的損害。
第二部分 “Babysitter”神經(jīng)寄養(yǎng)修復周圍神經(jīng)損傷的療效和機制研究
目的:研究應用“Babysitter”神經(jīng)寄養(yǎng)法修復大鼠周圍神經(jīng)損傷的可行性和療效,并初步探討其分子機制。
方法:80只Lewis大鼠腓神經(jīng)切斷后,按照不同顯微外科修復方式隨機分為4組:A組(20只),腓神經(jīng)遠、近斷端曠置,縫合于
6、鄰近的肌肉內(nèi);B組(20只),腓神經(jīng)遠近斷端行原位神經(jīng)外膜縫合;C組(20只),脛神經(jīng)外膜開窗,與腓神經(jīng)遠端行端側(cè)吻合;D組(20只)脛神經(jīng)40%切斷,與腓神經(jīng)遠斷端行端側(cè)吻合。術后8周,各組大鼠行二次手術,將腓神經(jīng)遠端與近端行端端外膜縫合。二次術后4周、8周、12周和24周,每組各取5只大鼠神經(jīng)電生理檢測腓神經(jīng)的LDRs和ARRs,半薄切片甲苯胺藍染色觀察神經(jīng)纖維再生,檢測有髓神經(jīng)纖維恢復率;檢測脛前肌強直肌張力恢復率、肌重維持率和最
7、大肌纖維面積恢復率。各時間點大鼠處死后取L4-6脊髓節(jié)段和脛前肌行石蠟切片,免疫組化染色觀察脊髓和肌肉中IGF-1的表達,以及肌肉中TWEAK和Fn14因子的表達變化。
結果:術后4周和8周,B組大鼠腓神經(jīng)ARR較其余三組均明顯增高;術后24周,各組ARR無明顯不同。術后4周,B組、C組和D組大鼠腓神經(jīng)LDR無顯著差異,B組較A組明顯減低;術后24周,B組與D組LDR無明顯差異,較A組與C組明顯降低。術后4周,B組有髓纖維數(shù)日
8、明顯高于其余三組,D組纖維數(shù)目明顯高于A組和C組;術后24周,B組與D組有髓纖維數(shù)目無顯著差別,均高于A組和C組。
術后4周-12周,B組大鼠脛前肌肌力恢復率TTRR明顯高于其余三組,術后24周與D組無明顯差異,高于A組。術后4周,D組大鼠脛前肌TTRR與A組和C組無差異;術后24周與C組無差異,較A組仍明顯增高。
術后4周-12周,B組大鼠脛前肌肌重維持率MWMR明顯高于其余三組,術后24周與D組無差異。術后4周,
9、D組大鼠脛前肌MWMR與A組和C組無差異,術后8周較A組和C組顯著增高,術后12周和24周與C組無差異,但仍較A組明顯增高。
術后4周,B組大鼠脛前肌纖維橫截面積恢復率明顯高于其余三組,A組、C組和D組間無差異;術后24周,B組和D組大鼠脛前肌纖維橫截面積恢復率明顯高于A組和C組,B組仍較D組明顯增高。
免疫組織化學染色結果:脊髓中IGF-1表達B組與D組相似,近期(4周)和遠期(24周)蛋白表達均較A組C組增高;術
10、后4周,C組和D組脛前肌IGF-1大量表達,較A組和B組明顯增高,24周時各組IGF-1表達無差異。4周時A組、C組和D組脛前肌中TWEAK和Fn14表達均較B組顯著增高;術后24周,各組TWEAK表達無差異,D組Fn14表達與B組和C組無差異,顯著低于A組。
結論:“Babysitter”神經(jīng)寄養(yǎng)法可用于治療長節(jié)段復雜周圍神經(jīng)損傷,早期療效不及端端吻合,遠期可有效恢復神經(jīng)及其支配肌肉的結構和功能。40%供體神經(jīng)寄養(yǎng)較外膜開窗
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