神經寄養(yǎng)修復周圍神經損傷的療效和分子機制研究.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 端側吻合修復大鼠周圍神經損傷的實驗研究
　　目的:探討不同方式的端側吻合修復周圍神經損傷對供體、受體神經再生和肌肉萎縮保護的影響。
　　方法:60只Lewis大鼠腓神經切斷后，按照不同顯微外科修復方式隨機分為3組:A組（20只），腓神經遠近斷端行原位神經外膜縫合;B組（20只），脛神經外膜開窗，與腓神經遠斷端行端側神經外膜吻合;C組（20只），脛神經40％切斷，與腓神經遠

2、斷端行端側神經外膜吻合。術后6周、12周、18周和24周，每組各取5只大鼠，神經電生理檢測脛神經、腓神經的潛伏期和振幅恢復率，檢測腓腸肌和脛前肌最大強直肌張力恢復率，大鼠處死后測量腓腸肌和脛前肌肌重維持率，肌肉石蠟切片HE染色測量最大肌纖維橫截面積恢復率，脛神經和腓神經半薄切片后行甲苯胺藍染色觀察神經纖維再生，檢測有髓神經纖維恢復率。
　　結果:1.供體神經肌肉系統(tǒng):
　　各時間點，B組大鼠脛神經電生理、有髓纖維組織形態(tài)學以

3、及腓腸肌肌濕重、肌纖維橫截面積和肌力與A組無顯著差異;C組大鼠脛神經神經電生理(ARR和LDR)術后6周均明顯受累，ARR均較其余兩組明顯減低，LDR較A組和B組明顯延長，12周后各組ARR和LDR無差異;C組大鼠脛神經有髓纖維恢復率在術后6周和12周明顯低于B組，術后18周和24周時與B組無明顯差異;C組大鼠腓腸肌肌重、肌力和肌纖維面積在研究早期（6周-18周）不同程度受損，術后24周均獲得有效恢復。
　　2.受體神經肌肉系統(tǒng):

4、
　　術后18和24周，B組大鼠腓神經潛伏期較A組和C組明顯延長。各時間點C組大鼠腓神經有髓纖維數(shù)目、脛前肌最大強直肌力恢復率和肌纖維橫截面積恢復率均較B組明顯增高，與A組無明顯差別。術后6周，各組脛前肌肌重維持率無顯著差異，12周后A組和C組脛前肌肌重維持率均顯著高于B組。
　　結論:伴有供體神經外膜開窗或部分切斷的端側吻合均可獲得受體神經纖維再生和受體肌肉肌重、肌力的恢復。外膜開窗對供體神經肌肉系統(tǒng)不會產生顯著的影響和損

5、害。部分供體神經切斷的端側吻合可以獲得更有效的神經肌肉系統(tǒng)恢復，但術后早期難以避免發(fā)生供體系統(tǒng)的損害。
　　第二部分 “Babysitter”神經寄養(yǎng)修復周圍神經損傷的療效和機制研究
　　目的:研究應用“Babysitter”神經寄養(yǎng)法修復大鼠周圍神經損傷的可行性和療效，并初步探討其分子機制。
　　方法:80只Lewis大鼠腓神經切斷后，按照不同顯微外科修復方式隨機分為4組:A組（20只），腓神經遠、近斷端曠置，縫合于

6、鄰近的肌肉內;B組（20只），腓神經遠近斷端行原位神經外膜縫合;C組（20只），脛神經外膜開窗，與腓神經遠端行端側吻合;D組（20只）脛神經40％切斷，與腓神經遠斷端行端側吻合。術后8周，各組大鼠行二次手術，將腓神經遠端與近端行端端外膜縫合。二次術后4周、8周、12周和24周，每組各取5只大鼠神經電生理檢測腓神經的LDRs和ARRs，半薄切片甲苯胺藍染色觀察神經纖維再生，檢測有髓神經纖維恢復率;檢測脛前肌強直肌張力恢復率、肌重維持率和最

7、大肌纖維面積恢復率。各時間點大鼠處死后取L4-6脊髓節(jié)段和脛前肌行石蠟切片，免疫組化染色觀察脊髓和肌肉中IGF-1的表達，以及肌肉中TWEAK和Fn14因子的表達變化。
　　結果:術后4周和8周，B組大鼠腓神經ARR較其余三組均明顯增高;術后24周，各組ARR無明顯不同。術后4周，B組、C組和D組大鼠腓神經LDR無顯著差異，B組較A組明顯減低;術后24周，B組與D組LDR無明顯差異，較A組與C組明顯降低。術后4周，B組有髓纖維數(shù)日

8、明顯高于其余三組，D組纖維數(shù)目明顯高于A組和C組;術后24周，B組與D組有髓纖維數(shù)目無顯著差別，均高于A組和C組。
　　術后4周-12周，B組大鼠脛前肌肌力恢復率TTRR明顯高于其余三組，術后24周與D組無明顯差異，高于A組。術后4周，D組大鼠脛前肌TTRR與A組和C組無差異;術后24周與C組無差異，較A組仍明顯增高。
　　術后4周-12周，B組大鼠脛前肌肌重維持率MWMR明顯高于其余三組，術后24周與D組無差異。術后4周，

9、D組大鼠脛前肌MWMR與A組和C組無差異，術后8周較A組和C組顯著增高，術后12周和24周與C組無差異，但仍較A組明顯增高。
　　術后4周，B組大鼠脛前肌纖維橫截面積恢復率明顯高于其余三組，A組、C組和D組間無差異;術后24周，B組和D組大鼠脛前肌纖維橫截面積恢復率明顯高于A組和C組，B組仍較D組明顯增高。
　　免疫組織化學染色結果:脊髓中IGF-1表達B組與D組相似，近期（4周）和遠期（24周）蛋白表達均較A組C組增高;術

10、后4周，C組和D組脛前肌IGF-1大量表達，較A組和B組明顯增高，24周時各組IGF-1表達無差異。4周時A組、C組和D組脛前肌中TWEAK和Fn14表達均較B組顯著增高;術后24周，各組TWEAK表達無差異，D組Fn14表達與B組和C組無差異，顯著低于A組。
　　結論:“Babysitter”神經寄養(yǎng)法可用于治療長節(jié)段復雜周圍神經損傷，早期療效不及端端吻合，遠期可有效恢復神經及其支配肌肉的結構和功能。40％供體神經寄養(yǎng)較外膜開窗