玉米主要霉菌毒素體外評定與吸附劑研發(fā).pdf

1、霉菌毒素是霉菌在基質(zhì)（飼料、飼料原料等）上生長的過程中所產(chǎn)生的有毒的次級代謝產(chǎn)物，包括霉菌使基質(zhì)（飼料）的成分轉(zhuǎn)變而形成的有毒物質(zhì)。霉菌毒素能夠干擾許多靶器官和系統(tǒng)，尤其是肝、腎、神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)，引發(fā)人類和動物疾病。研究表明當(dāng)植物受到霉菌毒素的侵害時，會進(jìn)行自我保護，將非極性的毒素與糖、氨基酸或硫酸鹽等結(jié)合，轉(zhuǎn)化為極性更強的代謝產(chǎn)物，儲存在液泡中或結(jié)合在器官、組織、細(xì)胞器等的生物大分子上，從而產(chǎn)生霉菌毒素的結(jié)合態(tài)。常規(guī)的

2、霉菌毒素檢測方法只能檢測到游離態(tài)的霉菌毒素，而檢測不到結(jié)合態(tài)的霉菌毒素，因而這部分結(jié)合態(tài)的毒素也被稱為隱蔽性毒素。然而研究表明結(jié)合態(tài)的霉菌毒素經(jīng)動物消化后會被部分或全部釋放出來，危害畜禽的健康。因此，建立一種快速真實地評定飼料及飼料原料中霉菌毒素（游離態(tài)和結(jié)合態(tài)）的含量顯得尤為重要。本研究通過3個試驗分別研究了霉菌毒素的體內(nèi)外釋放測定，在此基礎(chǔ)上分析了現(xiàn)有的霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的吸附效率，并開展了新型吸

3、附劑的開發(fā)研究。
　　為了能夠真實地評定結(jié)合態(tài)和游離態(tài)的霉菌毒素，本試驗建立了體外消化評定法。通過體外消化法模擬動物體內(nèi)的消化過程對發(fā)霉玉米進(jìn)行消化。玉米樣品在60目的篩下物樣品，先后用胃蛋白酶和胰蛋白酶進(jìn)行體外消化，然后再用ELISA的方法對消化前后的霉菌毒素進(jìn)行檢測。試驗結(jié)果表明玉米中的霉菌毒素AFB1(P＜0.001)、DON(P＜0.01)、ZEN(P＜0.05)經(jīng)過體外消化后毒素含量會明顯升高。采用了高效液相色譜法對EL

4、ISA檢測的結(jié)果進(jìn)行了驗證，試驗結(jié)果表明表明玉米中的霉菌毒素AFB1(P＜0.05)、DON(P＜0.001)、ZEN(P＜0.001)經(jīng)過體外消化后毒素含量會明顯升高，高效液相色譜法進(jìn)一步驗證了玉米中的霉菌毒素AFB1、DON、ZEN經(jīng)過體外消化后毒素含量會明顯升高。為了驗證體外消化試驗結(jié)果的真實性，還進(jìn)行了肉雞體內(nèi)消化試驗來驗證體外消化試驗的結(jié)果。試驗挑選10只體重基本一致的健康A(chǔ)A肉仔雞，單籠飼養(yǎng)，禁食12h，自由飲水，自由采食含

5、1％三氧化二鉻的發(fā)霉玉米4h，采集十二指腸、空腸、回腸內(nèi)容物。分別檢測飼料、十二指腸內(nèi)容物、空腸內(nèi)容物、回腸內(nèi)容物中的三氧化二鉻（濕法消化法）及霉菌毒素AFB1、DON、ZEN含量(ELISA)。試驗結(jié)果表明發(fā)霉玉米經(jīng)肉雞體內(nèi)消化后AFB1(P＜0.05)、DON(P＜0.05)、ZEN(P＜0.01)的含量顯著升高。
　　上述結(jié)果表明:霉菌毒素在玉米體內(nèi)存在結(jié)合態(tài)和游離態(tài)兩種形式，結(jié)合態(tài)霉菌毒素經(jīng)消化后會被充分的釋放出來，轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

6、游離態(tài)的霉菌毒素。
　　為了真實地評價霉菌毒素吸附劑的吸附效果，本試驗還通過體外消化評定法對市場上收集的10種霉菌毒素吸附劑的吸附效果進(jìn)行了評定，試驗結(jié)果表明3＃、9＃吸附劑對三種毒素均有較好的吸附效果，其它吸附劑對各個毒素的吸附效果各有側(cè)重，3＃、9＃是酵母細(xì)胞產(chǎn)品，這說明酵母細(xì)胞產(chǎn)品對霉菌毒素的吸附效果較好。
　　為了有效地去除飼料中的霉菌毒素，本課題研發(fā)了一種新型經(jīng)濟有效的霉菌毒素吸附劑，并用體外消化評定法對該吸附劑的