1型糖尿病與HLA-DRB1基因頻率的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：
　　 探討HLA-DRB1基因頻率與1型糖尿病的關(guān)聯(lián)，尋找山西地區(qū)1型糖尿病患者HLA-DRB1位點(diǎn)的易感基因和保護(hù)基因，從而為研究1型糖尿病的病因及其發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù)。
　　 材料和方法：
　　 選取30例1型糖尿病患者及30例漢族健康人DNA。采用聚合酶鏈反應(yīng)序列特異性寡核苷酸探針(PCR-SSO)方法，對(duì)30例1型糖尿病(T1DM)患者標(biāo)本DNA和30例對(duì)照標(biāo)本DNA的HLA-DRB1基因進(jìn)行分

2、型。并選擇低分辨分型有顯著差異的患者和健康對(duì)照者DNA，對(duì)其HLA-DRB1等位基因再進(jìn)行高分辨分型。
　　 結(jié)果：
　　 首先，T1DM組中，低分辨分型共檢出12種HLA-DRB1等位基因分別為DRB1*01、DRB1*03、DRB1*04、DRB1*07、DRB1*08、DRB1*09、DRB1*11、DRB1*12、DRB1*13、DRB1*14、DRB1*15、DRB1*16，基因頻率范圍是1.67％～21.67

3、％，其中DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09、DRB1*12等位基因的頻率較高，分別為16.67％、23.33％、21.67％、13.33％，而DRB1*01、DRB1*13、DRB1*16等位基因的頻率較低，均為1.67％。
　　 對(duì)照組中，低分辨分型共檢出13種HLA-DRB1等位基因分別為DRB1*01、DRB1*03、DRB1*04、DRB1*07、DRB1*08、DRB1*09、DRB1*10、DRB1*11

4、、DRB1*12、DRB1*13、DRB1*14、DRB1*15、DRB1*16，基因頻率范圍為1.67％～16.67％，其中DRB1*12、DRB1*13、DRB1*14、DRB1*15等位基因的頻率較高，分別為15％、10％、10％、16.67％。DRB1*03、DRB1*10、DRB1*16等位基因的頻率較低，分別為3.33％、1.67％、1.57％。
　　 T1DM組中DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09與正常

5、對(duì)照組比較，差異有顯著性(P＜0.05)，其基因頻率高于對(duì)照組，即DRB1*03(16.67％VS3.33％，P=0.015)；DRB1*04(23.33％VS8.33％，P=0.024)；DRB1*09(21.67％ VS8.33％，P=0.041)。因此DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09與T1DM成正相關(guān)，為T1DM的易感基因。而DRB1*15與正常對(duì)照比較也有顯著差異，其頻率低于對(duì)照組，即DRB1*15(5％ VS16

6、.67％，P=0.040)，DRB1*15與T1DM成負(fù)相關(guān)，為T1DM的保護(hù)基因。
　　 T1DM中HLA-DRB1雜合子基因DR3/DR4、DR3/DR9、與正常對(duì)照比較差異無顯著性。
　　 次，對(duì)低分辨分型有顯著差異(DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09、DRB1*15)的患者和健康對(duì)照者DNA，進(jìn)行的HLA-DRB1等位基因高分辨分型中發(fā)現(xiàn)：
　　 T1DM患者組中，10例患者的DRB1*03中

7、，檢出1種高分辨型基因，為DRB1*03∶01。14例患者的DRB1*04中共檢出4種高分辨基因型：即DRB1*04：05基因(9例)，頻率為15％；DRB1*04∶04基因(2例)，頻率為3.33％；DRB1*04∶03基因(1例)，頻率為1.67％；DRB1*04∶01基因(2例)，頻率為3.33％。其中DRB1*04∶05頻率比較高，DRB1*04∶04，DRB1*04∶03，DRB1*04∶01摹因頻率比較低。13例DRB1*0

8、9中檢出1種高分辨型基因DRB1*09∶01。3例DRB1*15中檢出1種高分辨基因?yàn)镈RB1*15∶01。
　　 對(duì)照組中，2例對(duì)照者的DRB1*03中檢出1種高分辨型基因?yàn)镈RB1*03∶01。5例對(duì)照者的DRB1*04中共檢出2種高分辨型基因：即DRB1*04∶06基因(4例)，頻率為6.67％；DRB1*04∶05(1例)，基因頻率為1.67％。5例對(duì)照者的DRB1*09中檢出1種高分辨基因?yàn)镈RB1*09∶01。10例

9、對(duì)照者的DRB1*15中檢出1種高分辨型基因?yàn)镈RB1*15∶01基因。
　　 T1DM組中，DRB1*03∶01、DRB1*04∶05、DRB1*09∶01與正常對(duì)照比較有顯著差異(P＜0.05)，其基因頻率高于對(duì)照組：DRB1*03∶01(16.67％VS3.33％，P=0.015)；DRB1*04∶05(15％VS1.67％，P=0.008)；DRB1*09∶01(21.67％VS8.33％，P=0.041)。DRB1*0

10、3∶01、DRB1*04∶05、DRB1*09∶01與T1DM成正相關(guān)，為T1DM的易感基因。DRB1*15∶01與正常對(duì)照比較有顯著差異(P＜0.05)，其基因頻率低于對(duì)照組(5％VS16.67％，P=0.040)，為T1DM的保護(hù)基因。
　　 結(jié)論：
　　 本研究采用了PCR-SSO法對(duì)DRB1進(jìn)行分型。分型到DRB1基因后的第4位是本研究的特點(diǎn)之一。發(fā)現(xiàn)DRB1*03∶01、DRB1*04∶05、DRB1*09∶0