甘草提取物及其活性成分抗阿霉素心臟毒性作用及其機(jī)制研究.pdf

1、阿霉素是一種高效的廣譜抗腫瘤藥物，但有可能引起嚴(yán)重的心臟毒性反應(yīng)，因此臨床應(yīng)用受到極大限制。此前，已通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明甘草提取物能預(yù)防和減輕阿霉素急性心臟毒性。但甘草提取物對(duì)阿霉素慢性心臟毒性有何影響尚不明確，其中發(fā)揮心臟保護(hù)作用的活性成分也不清楚。為此，開展了以下研究工作：
　　 采用阿霉素慢性心臟毒性(小鼠)模型，通過觀察動(dòng)物體重、存活率、心臟組織病理變化、心肌超微結(jié)構(gòu)變化，測(cè)定心肌線粒體琥珀酸脫氫酶活力、細(xì)胞色素c氧化酶活力

2、、活性氧生成量、脂質(zhì)過氧化程度和心肌組織高能磷酸物質(zhì)含量等指標(biāo)評(píng)價(jià)甘草提取物對(duì)阿霉素慢性心臟毒性的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草提取物干預(yù)能保護(hù)心肌組織和線粒體結(jié)構(gòu)，維持線粒體功能，改善能量代謝，顯示減輕阿霉素慢性心臟毒性的作用。
　　 采用H9c2細(xì)胞模型，比較了甘草中23個(gè)單體化合物對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。選取其中一組結(jié)構(gòu)相似且具有代表性的黃酮類化合物，測(cè)定清除超氧陰離子自由基的活力及其對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，探討生物活性與化學(xué)結(jié)構(gòu)之間的關(guān)

3、系。結(jié)果表明查爾酮較二氫黃酮具有更強(qiáng)的自由基清除活性和心肌細(xì)胞保護(hù)作用；但如果A環(huán)的4’-OH位被芹糖.葡萄糖取代，不但會(huì)失去心肌細(xì)胞保護(hù)活性，而且可能拮抗阿霉素的抗腫瘤作用。
　　 采用H9c2心肌細(xì)胞模型考察異甘草苷和甘草苷對(duì)阿霉素誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的影響。用Hoechst33342染色法和TUNEL法測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡率，用westem-blotting技術(shù)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bc1-x1和Bax的表達(dá)，用熒光法測(cè)定caspase

4、-8和caspase-3的活力，以及細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。發(fā)現(xiàn)異甘草苷和甘草苷均能抑制阿霉素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，其中異甘草苷可能通過線粒體和非線粒體兩條途徑發(fā)揮作用。
　　 綜上所述，甘草提取物能保護(hù)心肌線粒體結(jié)構(gòu)和功能，減輕阿霉素慢性心臟毒性。多種甘草黃酮類化合物對(duì)心肌細(xì)胞具有直接保護(hù)作用，其中查爾酮類化合物活性較強(qiáng)，且不影響阿霉素的抗腫瘤活性。典型的甘草黃酮化合物--異甘草苷和甘草苷均能抑制阿霉素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，但作用途徑存