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1、人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞表型和功能特性的研究腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移是血管生成依賴的,抑制腫瘤的血管生成可以抑制腫瘤的生長(zhǎng)和腫瘤的轉(zhuǎn)移.新近的研究資料表明:腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞是特殊分化的,它們?cè)诨?、形態(tài)、表型、和功能特性上與正常血管內(nèi)皮細(xì)胞相比都有明顯差異.因此,研究腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞的表型和功能特性對(duì)于研究腫瘤血管生成的機(jī)制、尋找和發(fā)現(xiàn)抗腫瘤血管生成治療的目標(biāo)因子都具有重要價(jià)值.1目的:通過對(duì)人肝癌組織分離培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞與人正常肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的比較
2、研究,分析人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞在形態(tài)、表型和功能上的特性.2方法:從人肝癌組織分離、純化和培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞并進(jìn)行鑒定;掃描電子顯微鏡(SEM)和透射電子顯微鏡(TEM)檢查細(xì)胞表面的窗孔結(jié)構(gòu);流式細(xì)胞儀(FACS)分析細(xì)胞表型;四唑鹽比色法(MTT)、酶聯(lián)免疫分析(ELISA)和酶譜法(zymography)比較肝癌內(nèi)皮細(xì)胞與人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞在細(xì)胞增殖、過氧化氫(H<,2>O<,2>)誘導(dǎo)的細(xì)胞毒、基質(zhì)金屬蛋白酶釋放和凝血、纖溶活性上的差別
3、.3結(jié)果:分離、純化的人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞典型的標(biāo)志分子vWF、CD31,并攝取乙?;兔芏戎鞍?掃描電鏡證實(shí)細(xì)胞表面存在大量窗孔;流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn),與人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞相比,肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)高水平的TNF Ⅱ型受體(TNFR p75)和低水平的TNF Ⅰ型受體(TNFR p55),細(xì)胞表面的各種粘附分子表達(dá)降低并特異性表達(dá)新生血管標(biāo)志αvβ3;功能學(xué)研究發(fā)現(xiàn):肝癌內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)高增殖率、對(duì)H<,2>O<,2>抵抗力強(qiáng)、釋放
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