應用孕鼠腹腔注射脂多糖合并缺氧方法制作腦癱動物模型的實驗研究.pdf

1、小兒腦性癱瘓(cerebral palsy,CP)簡稱腦癱,是指從出生前到出生后一個月內，因各種原因所致腦發(fā)育早期產生的非進行性腦損傷,主要表現(xiàn)為中樞性運動障礙及姿勢異常,同時經常伴有其他如智力低下、癲癇、語言障礙、行為異常及感知覺等并發(fā)障礙，遠期觀察會出現(xiàn)不同程度的神經發(fā)育障礙。小于胎齡兒、低出生體重兒、窒息復蘇、低氧血癥及輔助通氣等均為早產兒腦損傷的高危因素。其中早產、低出生體重兒是目前公認的最主要的腦癱致病因素之一，且孕齡越小,出

2、生體重越低,腦癱患病率就越高。在這些出生早產兒中，其中5%～10%患兒表現(xiàn)出運動能力的不協(xié)調性,通常是痙攣性一側肢體的偏癱,除此之外,25%～50%高危兒將會出現(xiàn)細微的精細運動和認知記憶障礙，CP的發(fā)生以嚴重影響了我國小兒成長中的日常生活和學習，以及生活質量和人口素質的提供。
　　 目前無論是對腦癱的流行病學的研究,還是對腦癱發(fā)病機制的認識，都在發(fā)生著很大的變化，各種觀點不一致，雖然公眾普遍認為，小兒腦癱的發(fā)生主要是與產前、產中

3、、產后小兒腦損傷有關,但是,最新研究越來越多的證實，腦癱病因具有多樣性和復雜性，其發(fā)病機制復雜，是一種多因素作用下的結果。引起早產兒腦損傷主要與早產兒圍產期窒息、缺氧缺血、宮內感染以及免疫學機制等有關。缺氧缺血和感染是導致早產兒腦損傷(white matter damage，WMD)主要病因，尤其是以腦室周圍白質軟化(periventricular leukomalacia，PVL)為主要特征是導致早產兒發(fā)生腦癱、認知以及視聽障礙等嚴重

4、后遺癥的病理表現(xiàn)之一，PVL在早產兒中的發(fā)生率非常高,國外研究資料表明，PVL在早產兒的發(fā)生率為8%-26%，有PVL跡象的早產兒高達75％；在出生體重小于1500g早產兒中，PVL發(fā)生率為5%-17%,且66%-99%早產兒發(fā)生了腦癱,25%的早產兒中存在神經運動功能障礙,25%-50%的學齡期患兒表現(xiàn)學習和認知功能障礙[9-11]，其逐年在增高, PVL損傷部位主要以側腦室外角部、前角和體部的白質以及視聽放射區(qū)為主。對PVL的發(fā)病過

5、程目前尚不完全清楚,可能與早產兒腦血管發(fā)育缺陷、少突膠質細胞(OL)前體對缺血缺氧的易損性，以及缺乏內源性保護因子等因素有關[12-13]，其病理改變表現(xiàn)為[14-15]腦室周圍正常白質結構的破壞、炎癥細胞的侵潤、膠質細胞凋亡增加、脫髓鞘改變以及軸突破壞等有關，業(yè)已證明PVL是導致早產兒死亡和傷殘的重要的病理因素，多發(fā)生于胎齡23～32周的早產兒，是導致存活早產兒出現(xiàn)遠期神經發(fā)育、智力運動異常、行為障礙等后遺癥發(fā)生的重要病理原因，目前對

6、小兒腦癱尚無特殊、全面系統(tǒng)的治療方法，因此，對CP患兒進行早期的診斷、早期干預、提高CP患兒的生存和生活品質；是目前對腦癱患兒亟待解決的重大課題。所以，動物模型的建立就被廣泛應用到基礎研究中，因為建立動物模型是進行基礎實驗研究的前提條件,借助可行的、逼真的動物模型,就可以更深入細致得研究早產兒腦損傷的病因、病理、發(fā)病機制以及治療和預后。因此，建立一個簡單易行、切實可行的腦癱動物模型，對疾病的實驗研究和臨床工作都具有重大的研究意義。

7、>　　 目前早產兒腦損傷的動物模型眾多,主要的制模方法有早產、感染、缺血缺氧及膽紅素等病理因素導致的早產兒腦損傷，在眾多的動物模型中，國內、國外較為公認、相對可靠穩(wěn)定的動物模型是以單側頸動脈結扎聯(lián)合缺氧造成一側大腦半球缺血缺氧動物模型，但是，腦癱是一種發(fā)病緩慢，早期臨床癥狀不典型的疾病，該動物模型主要是用來研究急性期或亞急性期的病變,與這種相對靜止期的病理變化不相符合,并且實驗動物的組織改變并不能代表人類的病理變化，動物在實驗過程中表

8、現(xiàn)出的運動神經系統(tǒng)等癥狀也不能反應出腦癱患兒的臨床表現(xiàn)，想要將其成熟地運用到腦癱動物模型,還有待于進一步制定統(tǒng)一的評判標準。
　　 本課題旨在通過應用孕鼠腹腔注射脂糖聯(lián)合全身缺氧方法共同作用下誘發(fā)胎鼠早產導致動物腦癱，并在此基礎上進行神經行為學、Morris水迷宮空間記憶實驗、神經電生理、病理形態(tài)學等檢測指標來全面觀察新生小鼠的行為反應，全面探討和總結模型的評價鑒定方法，真實客觀的反應模型的可重復性、模型與人類疾病的相似性或可比