角倍蟲源優(yōu)良品系篩選.pdf

1、角倍是角倍蚜寄生在漆樹科鹽膚木屬植物上所形成的蟲癭，它是五倍子的一種。五倍子因其豐富的單寧含量，廣泛應用于醫(yī)藥、化輕工和食品等領域，具有很高的經濟價值，其中角倍的分布最廣、產量最大，在市場上占據主導地位。目前，角倍來源主要依賴自然結倍，部分地區(qū)也建立人工培養(yǎng)基地，但遠不能滿足市場需求，且其加工不分品級，尤其是不同種類的五倍子混合處理，資源浪費現象明顯，篩選優(yōu)良品系，分等級對其有效成分提取利用，成為目前五倍子產業(yè)發(fā)展的重中之重。形成角倍的

2、蟲源為角倍蚜，屬于昆蟲綱Insecta半翅目 Hemiptera蚜總科 Aphidoidea蚜科 Aphididae五節(jié)根蚜族 Fordini倍蚜屬Schlechtendalia，對角倍的形成起著決定性的作用。所以角倍優(yōu)良品系的篩選首先是篩選出優(yōu)良的角倍蚜品系，從而提高角倍質量和產量。
　　本研究以mtDNA COI(細胞色素氧化酶I)和Cytb(細胞色素b)基因序列為分子標記，通過對角倍蚜樣本20個種群435個個體之間的遺傳變異

3、、遺傳結構和單倍型分布及其相互關系的分析，結合倍子單寧含量，篩選角倍蟲源的優(yōu)良品系。通過本實驗得到以下研究結果：
　?。?）共獲得角倍蚜mtDNA兩個蛋白質編碼基因Cytb和 COI的DNA序列，其基因聯(lián)合序列長度為1,167bp，其中 Cytb基因474bp，變異位點 V(Variable sites)15個(占3.16％)；COI基因693bp，變異位點17個(占2.46%)；聯(lián)合基因中含保守位點1,135個(占97.26%)

4、，變異位點32個(占2.74%)。兩個基因的密碼子的第一、二位點比較保守，變異主要發(fā)生在第三位點。mtDNA基因的A+T含量(76.3%)明顯高于G+C含量(23.7%)，堿基轉換明顯高于顛換，且第三位點的轉換/顛換比高于第一第二位點。
　?。?）角倍蚜20個種群435個樣本共包含43個單倍型，其中Hap5為主要單倍型，包含了17個種群112個樣本，分布最廣，且為原始單倍型。說明該單倍型能夠在角倍蚜分布區(qū)域的大部分地區(qū)生長、繁殖并

5、且結倍，是角倍蟲源中的優(yōu)勢單倍型。
　?。?）遺傳多樣性指數顯示，丹寨與五峰種群最高，峨眉種群最低。分組后發(fā)現，組內的遺傳多樣性范圍較小，單倍型多樣性(Hd)和總核苷酸多樣性(π)均為五組的指數最高，一組的指數最低。從角倍蚜對環(huán)境的適應性角度講，丹寨和五峰種群的角倍蚜可作為優(yōu)良品系人為的引入其他的區(qū)域進行繁殖。
　　（4）AMOVA分析結果顯示，角倍蚜種群內的變異高于種群間變異（FST值，P＜0.05)，表明角倍蚜各種群間基

6、因交流貧乏；遺傳距離與地理距離之間存在相關關系，說明地理距離包括山川或河流等影響了角倍蚜種群間的基因交流。篩選優(yōu)良品系進行人為的引種培養(yǎng)可以促進其廣泛的基因交流和倍子品質的提高。
　?。?）基于單倍型構建的分子聚類關系(MP和NJ樹)、TCS網絡結構圖以及Tajima's D值顯示，角倍蚜單倍型大部分以種群優(yōu)先的關系聚在一簇，湖北和貴州地區(qū)是角倍蚜種群的起源中心，為祖先類群，是核心種質資源，優(yōu)先重點保護的種群。
　?。?）通