黃芩優(yōu)良種源的篩選及其與基因組相關(guān)性研究.pdf

1、隨著野生黃芩被大量采挖，資源逐漸枯竭，栽培黃芩逐步成為主要商品來(lái)源。由于長(zhǎng)期人工栽培生產(chǎn)中只種不選，導(dǎo)致藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量參差不齊、化學(xué)成分不穩(wěn)定，因此有必要進(jìn)行優(yōu)良種源篩選工作，對(duì)黃芩的質(zhì)量進(jìn)行綜合分析。并且找到藥材質(zhì)量上的差異與遺傳基因之間的關(guān)系，從分子水平上揭示藥材的基因特征，為進(jìn)一步培育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)的黃芩品種提供一定的參考依據(jù)。 為了篩選出品質(zhì)優(yōu)良的黃芩種源，收集了7個(gè)產(chǎn)區(qū)34份野生與栽培黃芩樣品，對(duì)其中多種有效成分的含量進(jìn)

2、行綜合分析，包括采用紫外分光光度法測(cè)定總黃酮和多糖的含量；采用高效液相色譜法測(cè)定黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素的含量并測(cè)定樣品的HPLC指紋圖譜；采用石蠟切片法觀察不同種源黃芩根橫切面的顯微構(gòu)造；采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行遺傳基因組差異性的檢測(cè)，通過(guò)對(duì)其遺傳基因組差異的分析，研究并揭示黃芩質(zhì)量與遺傳基因組之間的相關(guān)性。 結(jié)果與討論： (1)對(duì)不同種源黃芩中黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、多糖和總黃酮的含量進(jìn)行測(cè)定，運(yùn)用灰色模式識(shí)別

3、法綜合分析，選擇Ri值在0.55以上為優(yōu)良種源。從化學(xué)質(zhì)量角度上初步篩選出河北寬城栽培、山西汾陽(yáng)栽培兩年生、山西汾陽(yáng)野生、山西離石野生黃芩為優(yōu)良種源。 (2)結(jié)合顯微構(gòu)造及外觀性狀研究，表明：所選出的黃芩優(yōu)良種源符合傳統(tǒng)認(rèn)為黃芩以條長(zhǎng)、質(zhì)堅(jiān)實(shí)、色黃質(zhì)量佳的觀點(diǎn)。 (3)通過(guò)對(duì)不同種源黃芩HPLC指紋圖譜的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)：①所選出的4個(gè)黃芩優(yōu)良種源中1、2、10(木樨草素)、15(漢黃芩苷)、17、18、19(黃芩素)、21(

4、漢黃芩素)、22(白楊素)、23(黃芩新素Ⅱ)、24(千層紙素A)號(hào)峰的絕對(duì)峰面積在所有樣品中較高。②承德野生黃芩在16min左右有兩個(gè)穩(wěn)定的色譜峰(3a、3號(hào)峰)出現(xiàn)，而其他種源(包括野生品和全部栽培黃芩樣品)的色譜圖中在此位置均只有一個(gè)色譜峰(3號(hào)峰)出現(xiàn)。因此初步認(rèn)為3a號(hào)峰可以作為承德野生黃芩HPLC指紋圖譜特征峰。 (4)通過(guò)對(duì)不同種源黃芩DNA遺傳基因組進(jìn)行ISSR-PCR測(cè)定，從遺傳樹(shù)狀圖中發(fā)現(xiàn)，初步選出的4個(gè)黃芩