Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、MDA在腎上腺疾病患者血清和組織中表達特點及臨床意義.pdf

1、研究目的:
　　 1、明確Cu/Zn-SOD(Copper/Zinc Superoxide dismutase,銅/鋅超氧化物歧化酶)、Mn-SOD(Manganese Superoxide dismutase,錳超氧化物歧化酶)活性和MDA(Malondialdehyde,丙二醛)含量在正常人和腎上腺疾病患者外周血血清中的表達情況。
　　 2、明確Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性在正常腎上腺組織和腎上腺疾病組織中的

2、表達情況。
　　 3、探討Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和MDA平衡失調(diào)所引發(fā)的機體氧自由基的產(chǎn)生和清除的平衡失調(diào)在腎上腺疾病發(fā)病中的作用,以及在不同腎上腺疾病間的表達差異,從而為腎上腺疾病的臨床鑒別診斷提供新的手段。
　　 研究方法與結(jié)果:
　　 一、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性和MDA含量在正常人和腎上腺疾病患者血清中的表達水平:
　　 選取廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院2008年1月～2009年3月因

3、腎上腺疾病住院手術(shù)、術(shù)后經(jīng)病理證實為腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤、腎上腺嗜鉻細胞瘤患者33例為病例組,其中腎上腺皮質(zhì)增生患者12例,腎上腺皮質(zhì)腺瘤患者10例,腎上腺嗜鉻細胞瘤患者11例。正常對照組11例。入選者于晨起采空腹肘靜脈血標(biāo)本4ml。采用黃嘌呤氧化酶法測定患者血清中SOD活性水平,硫代巴比妥酸法檢測患者血清中MDA含量。
　　 結(jié)果:①Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、MDA在正常對照組、腎上腺皮質(zhì)增生組、腎上腺皮質(zhì)腺

4、瘤組和腎上腺嗜鉻細胞瘤組患者血清中均有不同程度表達。與正常對照組相比,病例組各組間Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性顯著降低,MDA含量顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。②病例組各組間:腎上腺皮質(zhì)腺瘤組Cu/Zn-SOD活性降低最為顯著,與腎上腺皮質(zhì)增生組、腎上腺嗜鉻細胞瘤組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；Mn-SOD活性在腎上腺皮質(zhì)腺瘤組和腎上腺嗜鉻細胞瘤組中降低尤為顯著,與腎上腺皮質(zhì)增生組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(

5、P<0.05)；腎上腺皮質(zhì)腺瘤組和腎上腺嗜鉻細胞瘤組MDA含量升高尤為顯著,與腎上腺皮質(zhì)增生組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 二、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD水平在正常和腎上腺疾病組織中的表達:
　　 運用免疫組織化學(xué)方法對廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院2008年1月～2009年3月提供的常規(guī)石蠟包埋組織塊,其中腎上腺皮質(zhì)增生患者12例,腎上腺皮質(zhì)腺瘤患者10例,腎上腺嗜鉻細胞瘤患者11例,對照組11例,分別進行

6、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD染色。新鮮標(biāo)本經(jīng)10％福爾馬林固定18-24h,常規(guī)石蠟包埋,連續(xù)切片厚5μm,1張作HE染色,其余分別作Cu/Zn-SOD、Mn-SOD免疫組化染色。正常腎上腺作為陽性對照,PBS代替一抗作為陰性對照。陽性物均位于胞漿內(nèi),呈棕色。判斷標(biāo)準(zhǔn):陽性細胞面積占細胞總面積的百分比。比較腎上腺皮質(zhì)增生、皮質(zhì)腺瘤、嗜鉻細胞瘤和正常腎上腺等不同病例中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD染色陽性細胞占細胞總數(shù)百分比之間的差

7、異。
　　 結(jié)果:①Cu/Zn-SOD正常腎上腺髓質(zhì)、腎上腺嗜鉻細胞瘤表達呈陰性,而在正常腎上腺皮質(zhì)、腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤均有不同程度表達。與正常對照組皮質(zhì)組織和腎上腺皮質(zhì)增生組相比,Cu/Zn-SOD染色面積在腎上腺皮質(zhì)腺瘤組織中表達顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；②Mn-SOD則在正常腎上腺皮、髓質(zhì)、腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤和腎上腺嗜鉻細胞瘤組織中均有不同程度表達,與對照組皮質(zhì)相比,Mn-SOD染

8、色面積在腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤組織中顯著降低,三者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而腎上腺皮質(zhì)腺瘤組織的陽性細胞率最低。與正常對照組髓質(zhì)相比,腎上腺嗜鉻細胞瘤組Mn-SOD染色面積顯著降低,兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 三、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和MDA在血清和組織中表達的相關(guān)性分析
　　 (一)、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD與MDA在血清學(xué)的相關(guān)性分析
　　 Cu/Zn-

9、SOD活性與MDA含量在腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤、腎上腺嗜鉻細胞瘤組患者血清中表達呈負相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義(r=-0.859、r=-0.831、r=-0.644,P<0.05)。Mn-SOD活性亦與MDA含量呈負相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義(r=-0.817、r=-0.886、r=-0.714,P<0.05)。
　　 (二)、SOD血清學(xué)與組織學(xué)的相關(guān)性分析
　　 Cu/Zn-SOD血清學(xué)活性與組織中陽性細

10、胞面積在腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤呈正相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.823、r=0.821,P<0.05)。Mn-SOD血清學(xué)活性與組織學(xué)在腎上腺皮質(zhì)增生、腎上腺皮質(zhì)腺瘤、嗜鉻細胞瘤辦呈正相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.934、r=0.803、r=0.804,P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.Cu/Zn-SOD、Mn-SOD在腎上腺疾病血清和組織中活性降低和MDA含量升高,表明腎上腺疾病患者機體