大鼠失血性休克后不同液體復(fù)蘇對(duì)脾臟髓系抑制細(xì)胞數(shù)量變化影響的研究.pdf

1、目的：失血性休克是嚴(yán)重創(chuàng)傷及外科手術(shù)中常見(jiàn)的合并癥，不僅表現(xiàn)在循環(huán)功能失衡，同時(shí)伴隨著嚴(yán)重的免疫系統(tǒng)紊亂。研究表明,休克能增加宿主對(duì)外源性和內(nèi)源性感染的易感性，促使感染率的增加，這與其引起的免疫抑制有關(guān)。近年來(lái)，一群髓系來(lái)源的細(xì)胞因在免疫系統(tǒng)中有負(fù)向調(diào)控的作用而受到關(guān)注，這群細(xì)胞首先在腫瘤患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，并逐漸統(tǒng)一命名為“髓系抑制細(xì)胞(myeloid—derived suppressor cells；MDSCs)”，參與腫瘤免疫逃逸。20

2、07年，Delano等將這些細(xì)胞的研究由腫瘤學(xué)擴(kuò)展到感染免疫領(lǐng)域。研究表明，MDSCs對(duì)休克后伴隨的免疫反應(yīng)產(chǎn)生重要影響。失血性休克后，炎癥因子網(wǎng)絡(luò)被觸發(fā)，若不能及時(shí)終止其發(fā)生發(fā)展，常可導(dǎo)致免疫紊亂。目前，失血性休克后治療的主要手段之一是液體復(fù)蘇，但至今沒(méi)有確鑿證據(jù)表明哪種液體更好。本文研究的目的：建立一個(gè)穩(wěn)定可靠的失血性休克模型，在此基礎(chǔ)上初步探討失血性休克不同液體復(fù)蘇后脾臟中MDSCs數(shù)量變化，篩選出對(duì)失血性休克免疫抑制逆轉(zhuǎn)作用較強(qiáng)

3、的復(fù)蘇液體并指導(dǎo)以后的干預(yù)治療。
　　方法：⑴72只SD大鼠，隨機(jī)分成4組，假手術(shù)組（Sham組）、高滲氯化鈉復(fù)蘇組（HRS組）、乳酸林格氏液復(fù)蘇組（LRS組）、晶膠液復(fù)蘇組（LCRS組），Sham組僅接受麻醉，置管及動(dòng)脈監(jiān)測(cè)，不予放血，其余組大鼠建立失血性休克模型。⑵失血性休克模型，參照Chaudry方法建立失血性休克模型，快速放血至已肝素化的儲(chǔ)血瓶?jī)?nèi)，在10分鐘內(nèi)將平均動(dòng)脈壓降至40mmHg為目標(biāo)，期間通過(guò)調(diào)節(jié)放血速度控制血壓

4、。⑶模型制作成功后，分別以不同的液體(高滲氯化鈉液，乳酸林格氏液，晶膠液)進(jìn)行復(fù)蘇，復(fù)蘇后12，24，48小時(shí)分別處死（頸椎脫位法處死大鼠）各組大鼠6只（包括假手術(shù)組），取脾臟組織。⑷將脾臟組織制作成細(xì)胞懸液，His48、CD11bc試劑雙標(biāo)后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組脾臟中MDSCs，計(jì)算MDSCs的比例變化。
　　結(jié)果：①參照Chaudry法成功建立失血性休克模型，達(dá)到平均動(dòng)脈壓40mmHg的要求。②假手術(shù)組在三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)脾臟中M

5、DSCs數(shù)量變化在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)明顯差異。③相比于假手術(shù)組，失血性休克復(fù)蘇后MDSCs數(shù)量均有不同程度的升高，差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其數(shù)量變化有先升后降的趨勢(shì)。④三種不同的復(fù)蘇液體，在三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)以高滲鹽組復(fù)蘇后MDSCs數(shù)量升高程度相對(duì)較小。12h時(shí)，與晶膠液相比，差異不明顯，與乳酸林格氏液比，差異顯著。但在24h,48h同另兩組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：⑴用Chaudry法建立的失血性休克模型，操作簡(jiǎn)便，易于復(fù)制，能反