移植患者HCMV和BKV的定量檢測與臨床應(yīng)用研究.pdf

1、目的:
　　1.探討實時熒光定量PCR(Real-time PCR)技術(shù)同時檢測移植患者HCMV-DNA和BKV-DNA載量的臨床實用價值。
　　2.初步探討以移植患者體內(nèi)HCMV或BKV病毒載量為指標評估個體免疫狀態(tài)的可行性，為臨床治療提供參考依據(jù)。
　　方法:
　　1.隨機留取2009年1月至2010年6月期間在我院隨訪的314例移植患者592份外周血標本，采用Real-time PCR技術(shù)同時檢測標本DNA

2、中HCMV和BKV病毒載量，分析HCMV和BKVDNA血癥陽性率以及病毒載量的分布情況，評價此方法的可行性和臨床實用價值。
　　2.收集來自2009年10月至2010年9月在我院隨訪的移植患者603份外周血標本，采用ELISA法檢測每份血標本他克莫司濃度，并檢測其中540份血標本的生化指標，分析他克莫司血藥濃度與HCMV或BKV感染及患者肝功能或腎功能指標的關(guān)系，評價以移植患者體內(nèi)HCMV或BKV病毒載量為指標評估個體免疫狀態(tài)的可

3、行性和臨床意義。
　　結(jié)果:
　　1.314例移植患者共檢測到HCMV-DNA陽性106例(33.76％)，BKV-DNA陽性65例(20.70％)，前者陽性率高于后者(P=0.000)。腎移植患者HCMV-DNA和BKV-DNA陽性率分別為36.78％和21.90％;肝移植患者HCMV-DNA和BKV-DNA陽性率分別為24.70％和16.40％。病毒載量以低拷貝數(shù)(1×103 copies/ml)為主。
　　2.3

4、14例移植患者雙重病毒DNA(+)者為33例(占10.51％)，其中腎移植30例(12.40％)，肝移植3例(4.11％)。592份全血標本出現(xiàn)HCMV-DNA和BKV-DNA同步陽性總共有33例（占5.57％）。HCMV-DNA(+)組BKV-DNA陽性率為22.45％(33/147)，HCMV-DNA（-）組BKV-DNA陽性率為10.11％(45/445)，陽性組BKV-DNA陽性率高于陰性組（P＜0.05）;而BKV-DNA(+

5、)組HCMV-DNA陽性率為42.31％(33/78)，BKV-DNA（-）組HCMV-DNA陽性率為22.18％(114/514)，前組HCMV-DNA陽性率高于后組(P＜0.05)。提示兩種病毒可能存在相互激活作用。
　　3.BKV或HCMV DNA(+)者，其TAC血藥濃度比BKV或HCMV DNA（-）者較高(P值為0.030和0.049)，表明病毒DNA血癥與免疫抑制劑的使用量有關(guān)，腎移植病人HCMV-DNA血癥與TAC

6、藥物的關(guān)系尤為顯著(P=0.027)。
　　4.免疫抑制劑TAC使用量越大，病毒DNA血癥發(fā)生的風(fēng)險則越高，當(dāng)TAC血藥濃度在超過5.00ng/ml以后，病毒感染風(fēng)險明顯增加。HCMV-DNA血癥表現(xiàn)尤為顯著，高濃度組和低濃度組HCMV DNA陽性率分別為31.25％和22.47％(P=0.029)，在腎移植患者中表現(xiàn)更加明顯。
　　結(jié)論:
　　1.Real-time PCR能夠直接檢測到全血中HCMV和BKV病毒載量