GLP-1R、PKA在糖尿病骨質(zhì)疏松大鼠腎組織中表達.pdf

1、目的:當(dāng)今世界，隨著經(jīng)濟的高速發(fā)展和工業(yè)化進程的加速，人類健康面臨非傳染性疾病的威脅正日益增加，糖尿病患病率和糖尿病患者數(shù)量急劇上升。腸促胰素是人體內(nèi)一種腸源性激素，在進食后，該類激素的釋放可促進胰島素分泌，發(fā)揮葡萄糖濃度依賴性降糖作用，從而為人類治療糖尿病提供了嶄新的思路。GLP-1（Glacogon-likePeptide-1，胰高血糖素樣肽-1）作為腸促胰素的一種，其胰腺效應(yīng)及其他生物學(xué)效應(yīng)逐漸引起人們的注意。GLP-1受體表達于

2、胰腺，腸，中樞神經(jīng)系統(tǒng)，肺，腎臟和心臟等組織。GLP-1可發(fā)揮降脂、降壓作用，從而對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生保護作用;作用于中樞增強學(xué)習(xí)和記憶功能，保護神經(jīng);通過抗腎組織纖維化、減少氧化應(yīng)激、降低尿蛋白等對腎臟組織起保護作用;抑制骨吸收，保護骨骼等。眾多的受體與受體后傳導(dǎo)途徑及效應(yīng)器組成一個極為復(fù)雜的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，在此網(wǎng)絡(luò)中，任一部分的變化都可能影響到整個系統(tǒng)，從而引起相應(yīng)生物學(xué)效應(yīng)的變化，許多因素可以通過不同的機制影響細胞的受體數(shù)目和（或）受體

3、對配體的親和力，受體水平的變化與人生理狀態(tài)及疾病具有一定相關(guān)性。目前尚無糖尿病合并骨質(zhì)疏松動物模型腎組織GLP-1R（Glacogon-likePeptide-1Receptor，胰高血糖素樣肽-1受體）、PKA(ProteinKinaseA，PKA，cAMP依賴蛋白激酶，簡稱激酶A)表達情況的報道，本研究旨在為研究糖尿病、骨質(zhì)疏松、糖尿病腎病及糖尿病骨質(zhì)疏松的發(fā)病機制及治療提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)，探討GLP-1R、PKA在糖尿病合并骨

4、質(zhì)疏松大鼠腎組織的表達情況。
　　 方法:100只健康雌性Wistar大鼠(2.5-3月齡)經(jīng)喂養(yǎng)1周后隨機分成正常對照組（假手術(shù)組，NC組，N=24），單純?nèi)ヂ殉步M(NOVX組，N=26)，糖尿病對照組（糖尿病假手術(shù)組，DC組，N=24），糖尿病去卵巢組(DOVX組，N=26)。各組間大鼠體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義。小劑量STZ腹腔注射法聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)制作糖尿病大鼠模型;雙側(cè)卵巢切除法制作骨質(zhì)疏松大鼠模型。術(shù)后4周、8周、12周于

5、各組內(nèi)隨機取4只大鼠，經(jīng)麻醉處死后分離腎臟，快速腎組織取材，蠟塊包埋，采用免疫組織化學(xué)方法檢測NC組、NOVX組、DC組、DOVX組腎組織中GLP-1R、PKA水平的表達。處理實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件，實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（(x)±S）表示，各組數(shù)據(jù)符合正態(tài)性分布，組間比較采用單因素方差分析(one-wayANOVA)S-N-K法和Dunnett'sT3法，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:<

6、br>　　 1、各組腎組織HE染色
　　 NC組及NOVX組大鼠腎組織腎小球結(jié)構(gòu)清晰，血管袢薄而清晰，內(nèi)皮細胞和系膜細胞數(shù)正常，腎小管正常;DC組及DOVX組腎臟腎小球毛細血管內(nèi)可見嗜酸性物質(zhì)增多，內(nèi)皮細胞和系膜細胞數(shù)量增加，腎小管基膜增厚。
　　 2、各組腎組織GLP-1R表達
　　 GLP-1R表達于腎小管上皮細胞的胞膜和胞漿。去卵巢后4周、8周、12周，NOVX組、DOVX組表達均低于相應(yīng)對照組，4周、8

7、周NOVX組與NC組比有統(tǒng)計學(xué)差異。DC、DOVX組大鼠腎組織GLP-1R水平隨時間變化表達下降。
　　 3、各組腎組織PKA表達
　　 PKA表達于腎小管上皮細胞的胞漿。去卵巢后4周，NC組表達明顯低于NOVX組、DC組、DOVX組;去卵巢后8周，DOVX組明顯低于NC組;去卵巢后12周，NC組明顯低于DC組。
　　 結(jié)論:
　　 1、DC、DOVX組腎組織GLP-1R水平隨時間變化表達下降，可能與糖尿