益腎湯對糖尿病大鼠腎組織nephrin表達的影響.pdf

1、目的：用鏈脲佐菌素(Streptozocin，STZ)誘發(fā)、建立糖尿病大鼠模型；觀察中藥復方“益腎湯”對實驗性糖尿病大鼠腎臟的保護作用及對nephrin表達的影響，并以血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(Angiotensinreceptorblocker，ARB)“纈紗坦”作為對照，探討“益腎湯”防治糖尿病腎病(Diabeticnephropathy，DN)的作用機制。 方法：成年雄性SD大鼠50只，隨機分成4組，分別為正常對照組(CON

2、)、糖尿病未治療組(DMN)、糖尿病纈紗坦治療組(ARB)、糖尿病益腎湯治療組(YS)。各糖尿病大鼠于空腹狀態(tài)一次性腹腔內注射2％STZ誘發(fā)糖尿病模型；72小時后測定血糖，如血糖＞16.7mmol/L，并穩(wěn)定2-3天即算建模成功。ARB組給予纈紗坦，按20mg/公斤體重/天灌胃；YS組給予相當于生藥6.5g/公斤體重/天的濃縮藥液灌胃；CON及DMN組按相當劑量飲用水灌胃。各大鼠每周測量體重，根據體重調整喂藥量；10周后，測定每只大鼠體

3、重；留取24小時尿液，記尿量，測定24小時尿總蛋白、白蛋白含量；以10％水合氯醛麻醉處死大鼠，心臟取血測定血糖、糖化血紅蛋白(Hemoglobin，HbA1c)、血肌酐、血尿素氮、血胰島素等指標；取左腎經生理鹽水洗滌并擦干后稱重；取右腎縱形切開一半以10％中性福爾馬林固定，石蠟包埋，制作切片進行免疫組化檢測nephrin的表達及分布，并利用圖像分析系統(tǒng)進行定量分析；另一半右腎取皮質標本制作電鏡切片進行電鏡觀察、拍照，應用圖像分析儀對所拍

4、照片的腎小球毛細血管基底膜厚度(Glomerularbasementmembrane，GBM)進行分析、測量。 結果：大鼠成功誘發(fā)糖尿病。體重：DMN組顯著低于CON、ARB、YS三組(p＜0.05)；而ARB、YS組與CON組比較無顯著差異。腎重量：ARB、YS組顯著大于CON、DMN組(p＜0.05)；而腎臟相對重量則糖尿病各組均顯著大于CON組，DMN顯著大于ARB與YS組(p＜0.05)。血糖：糖尿病各組均顯著高于CON

5、組，ARB、YS二組顯著低于DMN組(p＜0.05)。HbA1c：所有糖尿病組顯著高于CON組，ARB、YS組顯著低于DMN組(p＜0.05)?？崭挂葝u素：DMN組顯著低于其它3組(p＜0.05)，ARB、YS組與CON組間比較無顯著差異。24h尿量：所有糖尿病組均顯著高于CON組，ARB、YS顯著低于DMN組(p＜0.05)。24h尿總蛋白：DMN組顯著高于其它3組(p＜0.05)，ARB、YS組與CON組間比較無顯著差異。24h尿白

6、蛋白：DMN組顯著高于其它3組，YS組顯著高于CON組(p＜0.05)，而ARB與CON組比較無顯著差異。血肌酐：各組間無顯著性差異。血尿素氮：DMN組顯著高于其余三組(p＜0.05)，CON、ARB、YS三組間無顯著性差異。GBM厚度：糖尿病各組顯著大于CON組，ARB、YS組顯著小于DMN組(p＜0.05)。腎臟nephrin表達：DMN組顯著低于其余三組，YS組顯著低于CON、ARB組(p＜0.05)；ARB與CON組比較無顯著差